血必净对猪原位肝移植缺血再灌注损伤的保护作用

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目的:通过本实验,探讨血必净对猪肝移植缺血再灌注损伤是否更具有保护作用及进一步研究肝移植缺血再灌注损伤的机制,掌握相关肝移植技术。材料与方法:(1)健康巴马小型猪25头,随机分为假手术组(A)、对照组(C)、实验组(B)。(2)B组行用血必净注射液+UW液,而C组用不含血必净注射液的UW液均持续低压灌注20分钟[2]。A组同肝移植受体的肝脏游离方法,不作任何结扎及阻断,不作肝切除。(3)检测动物存活率、无肝期及手术时间。BeckmanCX7全自动生化分析仪行术前及术后第1、2、3、7天肝功能检测:丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)。(4)取肝组织行苏木精-伊红(HE)染色,光镜观察肝组织的病理改变。(5)TUNEL法检测肝细胞凋亡[12]。(6)肝组织超氧化物歧化酶(SOD)检测:采用黄嘌呤氧化酶法。(7)用免疫组织化学法检测肝脏组织Bax、Bcl-xl的表达,计算其比值。(8)各组数据采用均数±标准差(x±s)表示,应用SPSS18.0统计软件包对检测数据进行分析,采用重复测量方差分析,再作两两比较,P<0.05具有统计学意义。结果:(1)B组、C组无肝期及手术时间无差异(P>0.05)。(2)术前B组、C组及A组各指标[6]无明显差异(P>0.05)。(3)移植术后1、2、3、7天B组、C组血清ALT、AST、TBIL水平较术前均明显升高,但B组值比C组低,两组每一天的值互相比较(P<0.05)。(4)光镜下观察肝组织,C组随着移植后时间的延长肝脏组织病理改变逐渐加重,肝小叶细胞明显水肿,呈气球样改变,肝巨噬细胞细胞增多、吞噬活跃,易见点状、灶状坏死区,汇管区明显扩大、水肿,存在炎症单个核细胞浸润;B组肝组织病变较对照组轻,随着时间延长有所恢复;A组肝组织无明显改变。(5)TUNEL法检测肝细胞凋亡:A组肝组织凋亡细胞最少,B组次之,C组最多,三组每一天的细胞凋亡率互相比较(P<0.05)。(6)三组每一天的SOD活性值互相比较具有统计学意义(P<0.05)。(7)B组Bax/Bcl-xl比值低于C组(P<0.05)。结论:1、血必净通过提高SOD的活性,减轻炎症反应,降低生化值,改善肝功能,对肝脏具有保护作用。2、血必净能调控Bax、Bcl-xl蛋白的表达,降低它们的比值,抑制肝细胞凋亡,减轻病理改变,从而保护肝组织。
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