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HCC患者外周血中低表达Prrx1基因的间质型CTCs促进肿瘤复发目的探讨肝细胞癌(HCC)患者外周血中上皮-间质表型循环肿瘤细胞(CTCs)与临床特征的相关性。方法回顾性分析2015年4月至2016年12月在南方医科大学珠江医院肝胆二科收治的77例HCC及21例肝脏良性病患者。所有患者均采用CanPatrolTM系统检测外周血中的上皮-间质表型CTCs。明确各表型CTCs特异性来源于肿瘤灶,进一步分析各表型CTCs与HCC临床特征的相关性。结果根据上皮及间质标志物,将CTCs分为上皮型、间质型及混合型三种表型。各表型CTCs在所有肝脏良性病患者外周血中均未检测到,而上皮型CTCs、混合型CTCs及间质型CTCs在77例HCC患者外周血中检测到的阳性率分别为37.7%(29/77)、74.0%(57/77)和 50.6%(39/77);各表型 CTCs 在 HCC 患者中的阳性率均显著高于肝脏良性病患者(P<0.05)。进一步分析发现:在HCC患者中,上皮型CTCs与AFP、肿瘤个数及门脉癌栓相关(P<0.05),混合型CTCs与门脉癌栓、肿瘤分化程度及巴塞罗那分级相关(P<0.05),间质型CTCs与肿瘤大小、门脉癌栓、肿瘤分化程度及巴塞罗那分级相关(P<0.05)。进一步分析发现,Prrx1低表达组的复发率(83%,5/6)高于高表达组(10%,1/10),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论上皮、混合、间质型CTCs能在不同方面反映HCC患者的临床特征,其可作为评估HCC患者病情的辅助指标。同时,低表达Prrx1基因的间质型CTCs可作为监测HCC复发的生物标志物。Prrx1对肝癌细胞生物学特性的影响目的探讨肝癌细胞中Prrx1表达水平对肿瘤表型、侵袭性及干细胞特性的影响。方法首先通过Western blot及qPCR实验来比较5株不同肝癌细胞株的Prrx1蛋白及mRNA表达差异,选取Prrx1表达水平较高的肝癌细胞株进一步行干扰实验,获得不同Prrx1表达水平的肝癌细胞。进一步观察细胞形态的改变并行细胞功能实验,比较Prrx1差异性表达对肝癌生物生物学特性的影响。结果我们发现在五株肝癌细胞中,肝癌细胞BEL-7404的Prrx1的表达水平最高。并通过慢病毒感染获得Prrx1低表达的肝癌BEL-7404细胞。Prrx1表达下调诱通过EMT诱导BEL-7404使其获得间质表型,并且,Prrx1表达下调的BEL-7404细胞侵袭的细胞数较阴性对照组明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。我们进一步通过Western blot和qPCR检测了两组细胞相关的干性指标(CD133、Nanog和Sox2),发现Prrx1表达下调的肝癌细胞BEL-7404其干性指标表达上调。结论Prrx1表达下调能诱导肝癌细胞发生EMT获得间充质表型,并能促使其侵袭能力增强并获得肿瘤干细胞特性。本项目通过探讨肝细胞癌(HCC)患者外周血中上皮-间质表型循环肿瘤细胞(CTCs)与临床特征的相关性。我们发现间质型CTCs与原发性肝细胞癌复发密切相关,且低表达Prrx1间质型CTCs更易形成转移灶。另外,我们的体外实验显示:肝癌Bel-7404细胞中Prrx1表达下调能诱导其发生EMT,促进侵袭能力增强并获得肿瘤干细胞特性。据此我们假设:肝癌细胞Prrx1表达下调,诱导肿瘤细胞发生EMT形成具有高侵袭性及肿瘤干细胞特性的间质型CTCs,促使转移灶的形成。本项目从细胞-临床两个层次,揭示低表达Prrx1肝癌间质型CTCs转移过程中的分子机制,为HCC转移的精准治疗提供依据。