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细胞周期的调节失控或细胞凋亡被抑制将会导致癌化细胞的无限增殖，并最终导致癌症的产生和发展。所以从分子细胞生物学角度，癌症可以看作是细胞周期和细胞凋亡的调控过程发生了紊乱，致使癌化细胞无限制地盲目增殖的一种状态。因此，对癌细胞的周期抑制活性和细胞凋亡诱导活性可用作寻找新的抗癌药物的筛选指标，由此发现的新的细胞周期抑制剂和细胞凋亡诱导剂有可能开发成新的抗癌药物。 鉴于此，本文采用温敏型小鼠乳腺癌细胞tsFT210，以细胞周期抑制及细胞凋亡诱导作为活性指标，对137种中草药的水提、醇提浸膏样品进行了生物活性筛选。筛选结果表明中草药粗叶悬钩子的醇提浸膏对tsFT210细胞系具有明显细胞周期抑制作用和一定的细胞毒、细胞凋亡诱导作用。我们遂采用活性追踪的方法对该中草药中的活性成分进行了研究。 粗叶悬钩子的提取分离的预试实验结果表明该植物的活性成分主要由两类物质组成：一类是具有细胞周期G0／G1期抑制作用的多酚羟基类物质；另一类是具有细胞凋亡诱导或细胞毒、细胞周期G2/M期抑制作用的三萜类物质。采用相应的手段将两类物质初步分离，并以相关的活性为指标，分别对每一类物质进行了活性成分的追踪分离和纯化精制。 多酚羟基类物质经Sephadex LH-20柱层析、ODS柱层析等分离手段，由活性部位逐步跟踪分离，得到了6个有活性的单体化合物，利用理化常数和光谱学手段（UV，IR，MS，1D-NMR，2D-NMR）对其结构进行了解析，其中有两个新结构活性化合物地榆鞣质H-2乙酯（5）和rubuphenol（6），四个已知结构新活性的化合物没食子酸乙酯（1），鞣花酸（2），1，2，3，4，6-五没食子酰-β-D-葡萄糖（3）和1，2，3，6-四没食子酰-β-D-葡萄糖（4）。其中，化合物1-6均为首次从该植物中分离得到，化合物1，3-6为首次从该属中分离得到。 沈阳药科大学博士论文 摘 要 O－CH，CH、i un O”C／K ．Uh l八 人 广一／卜二／＿G＝C一一＼‘”I一一口HI HO－－－－r ’ufx，P－OH＿＼＿U －－ N xw－ ＼＝＝x WH RO－＼——＼OH HO 丫”OH八／二＿＼／o“ OH ＼＼——＼ O OG IZ 3：R＝G 4：R＝H OH l＿＼＿HO l”llTh＼＿tLj＼tx－OH V／——＼＼Nillln、n W－OH CHqCHO－，G－－tr ／／－OH poo 一丫 ux NWNrenu 丫 Tx J ＼＿／V …口 丫 一 HO OH HO OH HO 56 三葩类物质经硅胶柱层析、高效液相层析，逐步跟踪分离该活性部位中的活性成 分，得到了十三个单体化合物，其中十二个为活性化合物。利用理化常数和光谱学手 段（U WMS，ID贝M凡ZD／N’ru－－－－r鉴定了其结构，其中有四个新结构活性化合 物：Zpe 3Q 19Q 23－四羟基一乌苏1展－28－酸上，23一异丙叉酮缩醇＊），3po顺 式－阿魏酚上 19L羟基－乌苏上2－烯上8－酸口4)，3尽0－反式－阿魏酚E 19L羟 基－乌苏－12－烯－28－酸（15），Za 3八 l沪三羟基－齐墩果－11，13（18）－＝烯－28－酸－19，28寸－ 内酯口8)，和八个已知结构活性化合物：乌苏酸（7），19a羟基乌苏酸p)，Za 3a H羟基一乌苏一12，19－H烯一28一酸 （），2q 3a二羟基一乌苏一12，18（19）一H烯一28一酸（10）， 铁冬青酸异丙叉酮缩醇＊2)，Za 3a 19a三羟基－乌苏刁－烯习8－酸工，3－异丙叉酮 缩醇口3)，3在O一顾式小魏酚＜。羟基－乌苏4－烯28－酸O6)，3在0－反式乃魏酚2。 羟基－乌苏上－烯上8－酸＊7)，和一个己知结构化合物齐墩果酸O9卜化合物7l 均 为首次从该植物中分离得到，化合物8刁，1418为首次从该属中分离得到。 2一 R： ／；cytffelwl－］R XIOOH l！IRI tOOH．．＿。、！W！八 ／ ＿lxvl xl～－－＊“／———” HQ－W MW xlx xe＊＊r HO－v－－－＊＊xx＊ HO