副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）嗜盐，属于弧菌科弧菌属，革兰氏阴性菌，短杆状。人类食用污染本菌的鱼、贝类等引致食物中毒，表现为水样腹泻、呕吐及发热。副溶血弧菌的主要致病因子有耐热直接溶血素(TDH)、耐热直接溶血素相关溶血素(TRH)、Ⅲ型分泌系统Ⅰ(T3SS1)和Ⅲ型分泌系统2(T3SS2)。近年发现副溶血弧菌具有Ⅵ型分泌系统(T6SS)，T6SS1主要贡献细菌对细胞的黏附力，T6SS2介导细菌对宿主细胞的粘附与自噬。　　 通过生物信息学方法对副溶血弧菌Ⅵ型分泌系统Ⅰ(T6SS1)基因簇分析，发现位于副溶血弧菌染色体1的VP1400蛋白可能具有潜在的磷酸化活性，属于蛋白激酶家族的丝氨酸/苏氨酸激酶。为了探索VP1400的功能，本试验利用同源重组的方法构建基因缺失株:应用融合PCR技术构建含有Vp1400基因两侧同源臂的重组自杀质粒p YAK1-Δ Vp1400，利用接合转移技术将pYAK1-ΔVp1400质粒从大肠杆菌CC118转移到副溶血弧菌中。在蔗糖选择压力下，质粒上的同源臂与基因组中的同源区发生交换，同时完成交换后的质粒凋亡，实现Vp1400基因的缺失.　　 为了探索VP1400功能，我们比较了亲本株HZ与ΔVp1400缺失株在不同培养环境下的生长与存活状态以及对宿主细胞的致病性.体外生长试验显示:与亲本株相比，ΔVp1400缺失株在LB和RPMI1640培养基中的生长变慢;在含5％ Triton-X100的生理盐水中，ΔVp1400缺失株存活能力降低;在人工肠道液中，ΔVp1400缺失株在24小时内的存活率要显著低于亲本株.上述结果表明VP1400对于副溶血弧茵适应体内外环境起着重要作用。为了比较亲本株HZ与ΔVp1400缺失株对宿主细胞的致病能力，本研究进行了Caco-2细胞毒性及细胞黏附试验、红细胞溶血试验。结果显示:ΔVp1400突变株对Caco-2细胞的粘附能力显著降低约38.6％，P＜0.01;作用3小时后ΔVp1400突变株对Caco-2细胞的细胞毒性显著降低约18.8％，P＜0.05;ΔVp1400突变株溶解兔红细胞的能力与亲本株相比也显著下降.　　 本研究结果表明，VP1400参与副溶血弧菌对环境的适应性和对肠上皮细胞感染性，在感染过程可能起重要作用.