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黄草乌（Aconitum vilmorimianum Kom.）为云南白药主要成分之一,是乌头属（Aconitum L.）毛茛科（Ranunculaceae）一种应用广泛的中药材,具有镇痛除湿的功效,同时也是当代医学中治疗糖尿病、高血压等病症的理想材料。然而,其入药部分根状茎含有剧毒,严重约束了该药物在临床上的应用。根据本研究组前期发现,BAHD基因家族是造成黄草乌毒性的主要原因,为后期验证基因功能提供植株再生遗传转化体系,本实验以黄草乌种子、腋芽、茎段、叶片为外植体,通过消毒条件的优选、芽诱导、愈伤组织诱导和分化等步骤,构建黄草乌再生体系,研究如下:种子萌发体系:以黄草乌种子为外植体,经过消毒条件优选、萌发诱导摸索黄草乌种子萌发体系的最适培养条件。在选择合适的外植体消毒条件的实验中,0.1%HgCl2为消毒剂,种子不萌发;75%酒精消毒30 s,10%NaClO消毒30 min条件下种子污染率为1.33±1.33%,是种子最佳消毒条件。该消毒条件下,种子在MS+2.0 mg/l 6-BA+0.1 mg/l NAA芽诱导培养基中萌发率达到66.00±4.89%,是最佳芽诱导培养基;100 mg/l浓度GA3对黄草乌种子进行打破休眠处理,种子萌发率提高到57.50±0.95%,是打破种子休眠的最适GA3浓度。茎段芽快繁体系:以带有第一腋芽的茎段为外植体,经过消毒、芽诱导和增殖摸索黄草乌茎段快繁体系的最适培养条件。0.1%HgCl2消毒6 min污染率为6.67±2.10%,芽诱导率为100.00±0.00%。MS+2.0 mg/l 6-BA+0.3 mg/l NAA是茎段芽诱导最适培养基,诱导率为100.00±0.00%。0.1 mg/l TDZ+0.1mg/l NAA是芽增殖最佳培养基,增殖系数最高为1.78±0.08。愈伤组织诱导:在愈伤诱导实验中,茎段为诱导愈伤组织最佳外植体选择;不同激素组合在茎段诱导愈伤组织的实验中,结果表明2.0 mg/l 2,4-D是最佳诱导愈伤组织培养基的选择。愈伤组织分化:不同浓度的TDZ和NAA在诱导黄草乌愈伤组织分化的实验中得到的效果并不理想,愈伤组织仅在1.0 mg/l TDZ+0.2 mg/l NAA中诱导出不定芽,分化率最高仅为8.00±4.89%。本研究通过探索各因素在实验中所产生的影响,从而筛选出适合黄草乌再生体系建立的最优条件,期望通过本实验的完成能够达到快速获取高品质无菌苗的目的,同时为本研究组的后期实验打下基础。