【摘 要】
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随着功能基因及基因组研究的深入以及生物信息学的发展,使得寻找和发现天然来源的新型抗生素的筛选技术已经逐渐从随机筛选向“定向筛选”转变。本研究以新疆盐环境放线菌为
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随着功能基因及基因组研究的深入以及生物信息学的发展,使得寻找和发现天然来源的新型抗生素的筛选技术已经逐渐从随机筛选向“定向筛选”转变。本研究以新疆盐环境放线菌为供试菌株,选取携带抗生素合成基因的嗜(耐)盐放线菌,通过发酵液抑菌活性测定,筛选出具有抗生素产生潜能的放线菌菌株,进而进行次生代谢产物研究以期发现新的抗菌化合物。1.携带抗生素合成基因的抑菌活性放线菌的筛选选取48株的新疆嗜盐放线菌为供试菌株,以金黄色葡萄球菌(5taphylococcusaureus),表皮葡萄球菌(Staphylococcuspidermidis),大肠杆菌(Escherichia co),白色念珠菌(Candida albican),热带念珠菌(Candidatropicalis 和克柔氏念珠菌(Candida krusei)为靶标菌,采用牛津杯法对48株放线菌发酵液的甲醇相和乙酸乙酯萃取相进行了体外抑菌活性筛选。共有18株菌表现出抑菌活性,其中9株为放线多孢菌,5株为拟诺卡氏菌,4株为链霉菌。另外拮抗金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的共有15株,拮抗白色念珠菌的共有有10株,拮抗大肠杆菌的有3株。18株菌中有16株菌含有PKS-I PKS-II和NRPS中的两种或两种以上基因,且含有两种基因的活性菌株在供试菌中所占比例较高,而含有三种基因的菌株具有较广的抗菌谱。菌株发酵液抗G+菌和抗白色念珠菌的抑菌活性部位不仅存在于乙酸乙酯萃取相也甲醇相。2.2株放线多孢菌抗菌活性物质研究选取两株放线多孢菌TRM H105和TRM 45106为研究对象,采用大孔树脂吸附、硅胶柱色谱、高效液相色谱、紫外,红外和核磁共振等波谱学等方法分离、纯化、鉴定发酵液抑菌活性物质单体化合物。从菌株TRM H105发酵液分离到1个香豆素类化合物6-羟基蜂蜜曲菌素,从TRM 45106分离得到2个脂肪酸类化合物。
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