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目的：观察外源重组人生长停滞特异性蛋白6（rhGas6）对缺氧复氧诱导的原代乳鼠心肌细胞及H9c2心肌细胞系损伤的影响，并初步探讨其与磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）存活通路的关系。
方法：第一部分对体外培养的原代乳鼠心肌细胞及H9c2细胞分别进行缺氧复氧，模拟大鼠心肌缺血再灌注模型，将培养的两种细胞随机各分为3组：正常对照组（Control组）、缺氧/复氧组（A/R组）及缺氧/复氧+Gas6预处理组（A/R+rhGas6组）。观察各组细胞形态及原代心肌细胞搏动频率，检测细胞存活率、LDH浓度及半胱氨酸蛋白酶（Caspase-3）活性变化，流式细胞仪检测细胞凋亡率。第二部分将培养的H9c2细胞随机分为4组：正常对照组（Control组）、缺氧/复氧组（A/R组）、缺氧/复氧+Gas6预处理组（A/R+rhGas6组）及缺氧/复氧+Gas6预处理+PI3K/Akt特异性阻断剂LY294002干预组（A/R+rhGas6+LY294002组）。采用AnnxinⅤ-FITC/P双染法并行流式细胞仪检测细胞凋亡率，免疫印迹法检测胞内磷酸化Akt（pAkt）蛋白表达情况。
结果：在第一部分原代心肌细胞中A/R组较Control组心肌细胞搏动频率（35±7vs94±3）次/分及生存率（48.5±4.0vs94.2±3.3）均下降（P<0.05），LDH浓度（206.67±16.31vs81.50±5.94）IU/L、Caspase-3活性水平（10.19±0.78vs3.23±0.41）％及凋亡率（14.51±0.82vs2.83±0.42）％均较Control组增加（P<0.05）。但经Gas6预处理后，心肌细胞搏动频率（78±6vs35±7）次/分及生存率（83.5±3.6vs48.5±4.0）％均显著增加（P<0.05），LDH水平（107.22±8.77vs206.67±16.31）IU/L、Caspase-3活性水平（5.17±0.64vs10.19±0.78）％及凋亡率（5.17±0.64vs14.51±0.82）％均较A/R组降低（P<0.05）。在H9c2细胞中，与A/R组比较，Gas6预处理组生存率（82.1±4.3vs43.2±3.5）％也显著增加（P<0.05），LDH水平（110.67±11.72vs193.83±17.25）IU/L、Caspase-3活性水平（4.63±0.50vs8.86±0.70）％及凋亡率（5.58±0.53vs12.16±0.68）％均下降（P<0.05）。在第二部分，经Gas6预处理的H9c2细胞的凋亡率明显低于A/R组（5.87±0.27vs12.14±0.56）％，pAkt表达水平较A/R组增加（1.6269±0.065vs1.3217±0.041，P<0.05）。但Gas6以上作用能被PI3K/Akt通路特异性阻断剂LY294002抑制，A/R+rhGas6+LY294002组细胞凋亡率明显增加（9.92±0.41vs5.87±0.27）％，pAkt表达水平降低（0.2978±0.011vs1.6269±0.065，P<0.05）。
结论：Gas6能减少缺氧复氧诱导的原代乳鼠心肌细胞及H9c2心肌细胞系损伤；H9c2细胞可以代替原代心肌细胞作为研究Gas6保护心肌的重要细胞株；Gas6对抗缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞凋亡，此作用机制可能是通过提高磷酸化Akt表达水平而激活PI3K/Akt通路实现的。