MAGE-A1、MAGE-A3基因在舌癌和涎腺癌中的表达及分析

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鳞状细胞癌是口腔中最常见的恶性肿瘤,以舌粘膜鳞癌为最多见。涎腺癌是一大类口腔颌面部所特有的肿瘤。目前对舌鳞癌和涎腺癌的治疗主要采用以手术治疗为主的综合治疗,特别是三联疗法,即化疗+手术+放疗。虽然外科手术、放射治疗和化学疗法使口腔颌面部肿瘤患者的5年生存率有了很大提高,但是外科手术、放射治疗和化学疗法各自都有一些并发症和后遗症,如放、化疗导致的口腔炎、口干、味觉丧失等,外科治疗后遗留的咀嚼、吞咽、语言等功能障碍和外貌畸形等。肿瘤的复发和转移仍是影响肿瘤预后的一个问题。 肿瘤特异性免疫治疗是通过启动自身主动免疫能力和提高杀伤肿瘤细胞能力,以达到监视细胞异变、消除手术残留癌灶、防止转移复发、提高肿瘤治愈率、延长存活期和提高生活质量的一种很有前途的肿瘤治疗方法。 肿瘤特异性抗原的发现是肿瘤特异性免疫治疗的关键。Boon等从特异性的杀伤性T细胞(cytotoxic T cell,CTL)入手,第一个成功分离了人类 黑色素瘤抗原(melanoma antigen,sGE),首次发现了肿瘤特异性抗原, 并建立了研究肿瘤抗原的技术路线[’]。MA(;不仅表达于黑色素瘤,还不同 程度地表达于多种组织类型的其他肿瘤,属肿瘤共同抗原[’1。 van der Brusgen P和Boon等口’使用基因转染技术发现了黑色素瘤细 胞系上的MAGE-l基因,该基因的表达产物即是肿瘤特异性抗原eGE。后 来的研究发现MAGE基因是一个大家族,它包括MAGE-A、MAGE-B、MAGE-C 三个亚家族。IlA{iE-A亚家族由 12种基因组成[’],以前分别命名为 eGE-1~ MAGE-12,但后来有人建议将其命名为WIGE-AI~MAGE-A12”‘,以区别稍后 发现的皿肪-B、m比卜C;皿肪-8亚家族由4个基因组成,分别为m优-81~ MA{iE-B4‘’·‘”;MA(}-C亚家族有一个成员,即 MA(;-CI’“’。 MAGE基因是一种肿瘤特异性抗原基因,只在各种不同组织类型的肿瘤 组织中表达:在正常组织中,除了胎盘组织和男性生殖细胞外不表达该类 基因[”-’‘j。sGE基因编码的肽段,由不同类型的人类白细胞抗原(human leucocyte antisen,HLA)I类分子递呈,可以被CTL特异识别,产生 CTL 对肿瘤细胞的特异性杀伤作用[‘’-’‘]。 由于 eGE-l、MAGE-3是最早发现的 MAGE基因[’],有关它们的研究有 较多的报道[‘’-”]。有人用它们进行肿瘤特异性免疫治疗的临床研究,取得 了使患者肿瘤缩小,甚至消退的效果[”1。 目前,研究eGE基因的方法主要有蛋白水平的组织切片中酶标免疫组 织化学(immunohistochemistry)法、血清中酶联免疫吸附(Enzyme linked ‘”“““o-sor5ant assays,ELISA)检狈法和mA水平的逆转录聚合酶链反 应(reverse transcrlltlon nolomerase challl reaction,RT-PCR)法。ELISA 法主要用于血清中MAGE-4蛋白的检测[”·”]。组织切片酶标免疫组织化学 法是在组织切片中检测蛋白表达。RT-PCR法是新近迅速发展起来的RNA检 测技术[”]。RT-PCR f具有准确、敏感、简便的特点,是目前MAGE基因检 4 测最常用的方法。 在分别使用肿瘤标本和培养肿瘤细胞系关于MAGE基因表达的研究中发 现,肿瘤细胞系较相应的肿瘤组织具有较高的MAGE基因表达阳性率[”’”· 30] 尽管国内外有关MAGE的研究已经多年,但是有关MA(;基因在最常见 的口腔上皮恶性肿瘤舌癌和诞腺癌中的表达状况尚未见研究报道。本课题 用盯-PCR法从RNA水平分析MAGE-AI、MAGE-A3基因在Tea-sll3、ACC-2 和ACC-M细胞株中的表达状况:取得进展后,再在舌鳞癌和诞腺癌组织及正 常舌和涎腺组织中研究上述基因的表达状况。以便明确口腔上皮肿瘤中有 无MAGE-AI、MA(;—A3基因的表达。观察肿瘤组织和正常组织中的eE-AI、 eGE-A3基因表达有无区别。了解不同性别、不同组织来源、不同肿瘤类 型、不同分化程度、不同的生物学行为(肿瘤是否转移)等状况下,基因 表达有无区别。以便评价这些基因及其产物作为舌癌和诞腺癌免疫学检测 分子标志物的意义和作为肿瘤特异性免疫治疗靶位的潜在价值。
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