术中快速诊断口腔癌颈淋巴结转移方法的建立及优化

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口腔癌80%以上是鳞状细胞癌,淋巴结转移是口腔癌致死的主要原因。目前临床上治疗口腔癌的方法主要是原发灶切除和颈淋巴清扫术。临床广泛存在的颈淋巴清扫过度的现象,使患者在身体、精神、经济等多方面为此付出了巨大的、不必要的代价。如何正确评价颈淋巴结转移的状态,选择颈淋巴清扫的合理术式,对患者进行适度的治疗,是该领域亟待解决的问题。【目的】探索一种准确性高、时间短、操作简易、费用低的术中诊断口腔癌颈淋巴结转移的检测方法。【方法】收集在山东大学齐鲁医院口腔颌面外科住院手术治疗的口腔癌患者的淋巴结,分别用以下五种方法对每例淋巴结进行检测,记录各方法所需时间、准确性、操作难度及费用:1.石蜡切片HE染色:常规石蜡包埋,连续切片,HE染色;2.细胞印片HE染色:制作细胞印片,HE染色;3.细胞印片免疫组织化学染色(IHC):对细胞印片按照二步法兔/鼠通用型免疫组化检测试剂盒提供的方法染色,检测细胞角蛋白;4.冰冻切片HE染色:制作冰冻切片,HE染色;5.冰冻切片免疫组织化学染色(IHC):对冰冻切片按照国际上采用的免疫组织化学的方法染色,检测细胞角蛋白。以颈淋巴清扫标本的病理检查结果作为颈淋巴结是否转移的标准,对几种方法的时间、准确率、费用、操作难度四个指标进行比较,优化出符合要求的检测方法。【结果】共收集2007年5月—2008年1月在山东大学齐鲁医院口腔颌面外科病房接受手术治疗的27例口腔癌患者的淋巴结标本71枚。临床病理报告实际阳性例数为29枚,与本实验中石蜡切片HE的结果一致,以此作为阳性标准。①冰冻切片HE:准确率96.55%,假阴性率3.45%,假阳性率2.3%,误诊率2.82%,费用2.0元,操作简单,时间仅需15分钟;②冰冻切片IHC:准确率100%,假阴性率0%,假阳性率2.38%,误诊率1.41%,费用最高50.5元,染色过程步骤较多,难度适中,时间约需1小时;③细胞印片HE:准确率93.1%,假阴性率12.9%,假阳性率0%,误诊率5.63%,费用最低,仅需0.5元,时间最少,10分钟即可,操作非常简单,但对阅片者要求高,需有经验者可明确诊断;④细胞印片IHC:准确率96.55%,假阴性率O%,假阳性率4.65%,误诊率2.82%,费用39.5元,制片简单,染色难度适中,步骤繁多,诊断容易,对阅片者要求低。冰冻切片HE联合IHC可使诊断准确率提高到100%。对各种方法应用配对四格表资料的χ~2检验,p>0.05,各种方法准确率无显著差异。【结论】1.术中冰冻切片HE染色操作简单,准确率高,费用低,时间短,可用作术中快速诊断口腔癌颈淋巴结转移的方法;2.术中冰冻切片HE联合免疫组化(IHC),可提高诊断准确率,减少误诊;3.印迹细胞学方法具有快速、简单易行且经济的优点,在基层医院中可作为首选的术中诊断淋巴结转移的方法,可加用免疫组化确诊。
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