小菜蛾抗药性问题的日趋突出和严重,引起了人们的广泛重视和研究。大量研究表明,许多杀虫剂都作用于昆虫的神经系统,通过神经细胞上的不同靶标如乙酰胆碱受体,神经膜上的钠通道等来起作用。但神经细胞由于其自身的特性,体外培养不易形成株系,因此,小菜蛾神经细胞的培养方法的建立有其必要性。在体外严格控制条件下进行抗药性机制的研究,具有简便快捷等优点,同时也便于在细胞水平和分子水平上研究小菜蛾的抗药性及其机理。本研究旨在探索出一套最适合小菜蛾神经细胞体外培养的方法和步骤,对培养出的细胞进行鉴定、传代并试图建立三个品系(敏感、抗氟虫腈与抗毒死蜱)小菜蛾细胞系,并进一步在细胞水平上验证小菜蛾的抗药性,为小菜蛾的抗药性机制研究以及生物测定提供一个快速、可严格控制的系统。具体研究内容如下：(1)筛选出Schneider’s Drosophila Medium培养液作为培养小菜蛾神经细胞的专用培养液,利用组织块培养法和酶消化法进行小菜蛾细胞培养,结果显示,组织块培养法更容易培养出小菜蛾细胞,在培养温度为26.0±1.0℃,所配制的去钙镁缓冲液pH值为6.4的条件下,成功地进行了三个品系小菜蛾脑组织神经细胞的原代培养。(2)同样采用组织块培养方法,对不同品系小菜蛾的胚胎细胞进行体外培养,成功培养出了原代细胞。并且对已经长满细胞瓶的胚胎原代细胞进行了传代,传代是以一比二的方法进行的,目前已传至第三代,且生长状况良好,有可能建立稳定的小菜蛾胚胎细胞系。对传代细胞进行染色体显色,符合鳞翅目染色体的特征。(3)定期观察和拍照记录培养的组织细胞,随机选择视野,测量神经突起的长度,比较三个品系脑组织的神经细胞的生长情况,试验结果表明抗性品系小菜蛾的神经细胞生长速度比敏感品系小菜蛾神经细胞快,突起的长度明显比同时期的敏感品系长。(4)进行了三个品系脑组织原代培养神经细胞的药剂试验(药剂为氟虫腈和毒死蜱),探讨了抗性品系(抗氟虫腈、抗毒死蜱)神经细胞对药剂的反应,通过观察和测定比较神经突起的长度,发现小菜蛾抗性品系与敏感品系神经细胞受药剂影响程度存在一定的差异,在细胞水平上反映了抗性差异,为进一步进行利用神经细胞研究小菜蛾的抗药性奠定了一定的基础。