荧光法研究中药中有效成分与牛血清白蛋白的相互结合作用

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荧光分析法在生物化学、医学、工业和化学研究中的应用与日俱增,其原因在于荧光分析法本身具有高灵敏度、高选择性、光谱简单和分析方法便捷等优点。 荧光猝灭是指某种物质的分子与荧光物质分子之间所发生的导致荧光强度下降的物理或化学作用过程。我们可以利用某种物质对某一荧光物质的荧光猝灭作用而建立对该猝灭剂的荧光测定方法,即荧光猝灭法。一般来说,荧光猝灭法比直接荧光测定法更为灵敏,并且具有更高的选择性。此外,猝灭效应的研究还可以用来揭示猝灭剂的控散速率,或在生物化学研究中用来推测蛋白质上结合点的位置和蛋白质的形状等。 蛋白质具有内源荧光,可作为能量给予体与某些药物受体发生反应,形成配合物,从而使蛋白质的内源荧光猝灭。血清白蛋白是血浆中含量最丰富的载体蛋白,因此,研究血清白蛋白与药物的相互结合作用具有重要的理论和现实意义。 本系列论文用荧光猝灭法和分光光度法研究了在水溶液中,中草药的三种有效成分槲皮素(Quercetin,QCT)、芦丁(Rutm,RT)、葛根素(Puerarin,PR)分别与牛血清白蛋白(Bovine SeAm Albumm,BSA)的相互结合反应。实验表明:槲皮素、芦丁和葛根素与牛血清白蛋白的相互结合,使牛血清白蛋白的内源荧光发生猝灭,这是一种静态猝灭过程。在水溶液中槲皮素、芦丁和葛根素与蛋白质牢固结合,其结合常数分别为:K研Qc7):1.12×10<6>L·mol<-1>、K<,B(RT)>=6.64×10<4> L·mol<-1>、K<,B(PR)>=1.37×10<6> L·mol<-1>。根据FSrster非辐射能量转移机理,分别求算了给体(BSA)与三种受体(QCT、RT、PR)间的相互作用距离r<,(QCT)>=3.69 nm、r<,(RT)>=4.82 nm、r<,(RT)>=3.44nm和能量转移效率E<,(QCT)>=0.317、E<,(RT)>=0.0359、E<,(PR)>=0.670。并根据热力学参数推测了槲皮素、芦丁和葛根素与牛血清白蛋白相互作用的作用力类型。
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