黄伞的交配及发育相关基因的研究

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黄伞[pholiota adiposa adiposa (Fr.) Qué 1.]是真菌门(Eumycota),担子菌纲(Basidiomycetes),同担子菌亚纲(Homobasidiae),伞菌目(Agaricales),球盖菇科(strophariaceae)鳞伞菌属的一种食药兼用真菌,是一种质脆味美营养丰富的珍稀食用菌。 本文以两个黄伞子实体为材料,经担孢子弹射,稀释分离获得两组Ⅰ和Ⅱ分别为27和104株单核体。通过采用三轮杂交系统研究,确定黄伞为四极性异宗配合的担子菌;实验还发现单核体不同类型在群体中的比例显示出明显的偏向性分布。 另外,本文应用mRNA差异显示技术研究了其各个不同的生长阶段的基因表达差异。分别选取菌丝体、原基、菇蕾、子实体柄、子实体盖为研究材料,提取总RNA。用锚定引物和随机引物对提取的RNA进行反转录和PCR反应,再用琼脂糖电泳进行差异显示,结果在78个电泳图谱中发现有32个有差异显示,选取其中的六个可能与黄伞结实有关的cDNA片段进行克隆测序,有五个测序成功,进行GeneBank比对后发现其中T11G B0322cDNA片段与氧类固醇结合蛋白(OSBP)基因有一定相似性,说明该片段可能是与黄伞结实相关的一个基因表达片段。
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