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目的：研究石斛酚、丁香酸的跨膜转运分子机制,为新药创制提供药代动力学依据,为提高靶向细胞内药物浓度和药物靶向疗效奠定坚实的理论基础。方法：1.石斛酚、丁香酸的细胞靶向识别作用：以荧光标记的石斛酚和丁香酸为实验材料,分别与人晶状体上皮细胞(HLEC)、人正常肝细胞(L-02)、人脐静脉血管内皮细胞(EA.hy926)、人肺癌细胞(A549)及人结肠癌细胞(SW480)孵育,比较各组细胞内的荧光强度,对荧光强度进行定量分析,来间接反映两种成分吸收进入细胞的量,进而判断石斛酚和丁香酸是否具有细胞靶向性。2. HLEC细胞内石斛酚、丁香酸吸收转运量的浓度依赖性考察：运用激光共聚焦扫描显微镜(LSCM)观察HLEC细胞内石斛酚、丁香酸在不同作用浓度下细胞内的荧光分布及强度,探讨两种成分吸收转运进入HLEC细胞的量与其浓度的相关性。3. HLEC细胞内石斛酚、丁香酸吸收量的时间依赖性考察：运用LSCM观察HLEC细胞内石斛酚、丁香酸在不同时间段内细胞内的荧光强度,探讨两种成分吸收转运进入HLEC细胞的量与孵育时间的相关性。4.不同细胞转运抑制剂及特定温度对石斛酚、丁香酸吸收转移进入HLEC细胞的影响：将HLEC细胞与含不同转运抑制剂的培养基孵育2h后,用LSCM观察,比较各组细胞中的荧光强度差异,计算来给你做成分的吸收抑制率。类似的,考察石斛酚、丁香酸吸收转运进入HLEC细胞收温度的影响情况。确定石斛酚、丁香酸的跨膜转运作用方式。5.用原子力显微镜检测石斛酚、丁香酸跨膜运输过程中,HLEC细胞膜表面粗糙度及超微结构的变化。结果：1.石斛酚吸收进入HLEC细胞内的量明显大于EA.hy926细胞,只有少量进入L-02、A549和SW480细胞；丁香酸吸收进入HLEC细胞及L-02细胞内的量明显大于SW480细胞及EA.hy926细胞,仅有少量药物进入A549细胞。2.石斛酚作用于HLEC细胞后,随着浓度的增加细胞内的荧光强度也增强,石斛酚浓度为1μg/ml时HLEC细胞内的吸收量较大,与其它各组相比**P<0.01,石斛酚主要分布在细胞质中；当石斛酚浓度达到10μg/ml时,细胞中的荧光强度达到最大且分布在整个细胞范围内。丁香酸作用于细胞后,随着浓度的增加细胞中的荧光强度也增强,当丁香酸浓度小于10μg/ml时,细胞内的荧光强度均较弱；当丁香酸浓度大于或等于10μg/ml时,细胞内的吸收量最大,且分布于细胞质和细胞核中,与其它各组相比##P<0.01。3.石斛酚、丁香酸分别作用于HLEC细胞时,0.5 h后细胞内即有少量荧光分子出现,细胞内荧光强度极弱,药物摄入量较少；随着时间的推移,细胞内的荧光强度迅速增加,培养时间为2h时,荧光强度达到峰值,后荧光强度迅速下降。4.石斛酚作用于HLEC细胞时,受能量抑制剂2,4-DNPH与NaN3作用的影响,细胞里的荧光强度较对照组分别下降了64.30%和48.82%；内吞抑制剂mβ-CD和CPZ作用HLEC细胞后,细胞内的荧光强度分别下降了87.02%和84.95%；硫酸蛋白受体竞争抑制剂(Hep)处理后,细胞里的荧光强度下降了67.96%。4℃培养环境下石斛酚吸收进入细胞的量降低了76.61%。丁香酸作用于HLEC细胞时,受能量抑制剂2,4-DNPH作用的影响,细胞里荧光强度较对照组下降了69.75%,而NaN3作用HLEC细胞后,和对照组相比,无统计差异；内吞抑制剂mβ-CD和CPZ作用HLEC细胞后,细胞里的荧光强度分别下降了88.81%和72.03%；Hep处理后,细胞里的荧光强度下降了54.25%。4℃培养环境下丁香酸吸收进入细胞的量降低了83.26%。5.石斛酚、丁香酸吸收转运过程中HLEC细胞膜表面出现凹坑结构：石斛酚作用后,细胞膜表面出现直径150-300nm,深度40～60nm的小坑,表面粗糙度由17nm变为26nm,细胞膜表面主要突出径粒高度由320～350nm上升到420～450nm,细胞膜表面出现胞吞的凹坑结构。丁香酸作用后,细胞膜表面出现直径125～350nm,深度约45～75nm的凹坑,平均粗糙度由16nm变为28nm,细胞膜表面主要突出径粒高度由105nm上升到210nm,细胞膜表面出现胞吞的凹坑结构。结论：石斛酚、丁香酸均能靶向性识别HLEC细胞,且跨膜进入HLEC细胞主要分布于细胞质内,吸收转运存在时间及浓度依赖性。转运抑制剂及温度对石斛酚、丁香酸的吸收有较大抑制作用。石斛酚、丁香酸跨膜转运过程中HLEC细胞膜表面有凹坑出现。因此,石斛酚、丁香酸跨膜转运方式是主动的、通过能量及网格蛋白载体介导的胞吞作用途径。