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硝基咪唑类(nitriodazoles)药物是一类具有5-硝基咪唑环结构的药物,主要用于预防和治疗家禽的滴虫病、猪的出血性下痢及厌氧菌感染,并可在畜禽饲料中添加作促生长用。兽医临床常用甲硝唑(metronidazole, MNZ)、地美硝唑(dimetridazole, DMZ)和异丙硝唑(ipronidazole, IPZ)等。但该类药物具有潜在的致癌、致畸、致突变作用,动物组织残留严重威胁食品安全。欧盟、美国等已相继禁止硝基咪唑类药物用作饲料添加剂,且规定可食性动物组织中不得检出该类药物。我国也规定禁止在所有食品动物中以促生长为目的使用甲硝唑、地美硝唑及其盐、酯及制剂。因此,在饲料、兽药残留监控实践中,寻求简便、快速、准确的硝基咪唑类药物检测方法十分必要。高效液相色谱(HPLC)法仍是最实用、最简便的方法。文献报道的该类药物HPLC检测方法中,存在诸如仅针对单一药物测定、采用含氯有机溶剂提取(毒性大)、检测限过高很难满足检测要求等不足。本文籍全国饲料标准化技术委员会农业行业标准制定项目资助,筛选、优化并确定了一种简单、快捷、重现性好,能同时测定饲料中甲硝唑、地美硝唑和异丙硝唑的HPLC方法。具体研究内容如下：1.色谱条件及样品前处理方法确定优化并确定了样品前处理条件,包括样品的提取条件和净化条件；优化并确定了色谱条件。饲料样品前处理方法如下：选用乙酸乙酯提取,提取液于35℃水浴中氮吹浓缩至近干后,经正己烷液液分配溶解于0.1 mol/L磷酸溶液中,经MCX固相萃取柱净化,过0.22μm滤膜；HPLC测定饲料中甲硝唑、地美硝唑和异丙硝唑的色谱条件为：ZORBAX SB-C18柱(4.6×250 mm,5μm),甲醇-水梯度洗脱,波长320 nm,柱温30℃,流速0.8 mL/min。2.分析方法验证考察了上述所建方法的专属性、线性、灵敏度、准确度和精密度等。结果显示：该方法专属性符合要求；甲硝唑、地美硝唑和异丙硝唑在两种饲料中添加浓度0.02～10.0 mg/kg范围内线性良好；三种药物在两种饲料中检测限均为0.01 mg/kg,定量限均为0.02 mg/kg；方法平均回收率在90.6%～107.7%范围内,日内精密度范围为1.2%～12.4%,日间精密度范围为2.8%～9.7%。该法操作简单、结果准确,可用于同时测定饲料中甲硝唑、地美硝唑和异丙硝唑的含量。