论文部分内容阅读
免疫分析是生物分析的重要分支,在疾病早期预警、临床诊断方面发挥着越来越重要的作用。电化学发光(ECL)是化学发光的一种特殊形式,是通过在电极表面产生一些特殊物质接受电子传递形成激发态进而产生发光的现象。电化学发光具有灵敏度高、可控制性好的优点,成为快速发展的电化学传感器。本论文开展了电化学免疫传感器方面的研究工作,主要研究内容如下:1、基于g-C3N4标记的信号增强型电化学发光免疫传感器以羧基化g-C3N4为ECL发光体,用作免疫标记物。以2-氨基对苯二甲酸电聚合膜修饰玻碳电极并固定免疫探针,并与目标抗原以及g-C3N4标记的二抗结合形成夹心式免疫配合物,在共反应剂存在下测定g-C3N4的ECL信号,构成信号增强型ECL免疫传感器。研究结果表明,免疫配合物中g-C3N4在共反应剂H2O2单独存在时,ECL信号强度很弱,单独使用共反应剂K2S2O8,虽然可以获得较强的ECL信号,但在其中加入H2O2,ECL信号显著增强,而且其强度随连续电位扫描次数的增加而增强。阻抗测定揭示了H2O2的协同增强作用机制为降低电极表面的膜阻抗,加速电子传递过程。在优化的实验条件下,建立的ECL免疫传感器检测癌胚抗原(CEA)的线性范围为0.01 pg/mL1ng/mL,检测限为3 fg/m L。2、基于g-C3N4纳米金的信号增强型电化学发光免疫传感器基于Au-g-C3N4良好的生物兼容性、大的比表面积和强的电化学发光性能,以Au-g-C3N4作为信号探针成功构建了一种用于灵敏检测甲胎蛋白(AFP)的三明治夹心结构的电化学发光免疫传感器。该免疫传感器能够实现0.1pg/m L1 ng/mL线性范围内对AFP的检测,检出限为0.03 pg/mL,并展现出优异的选择性和良好的分析性能。3、基于钯纳米粒子生物金属化及镍-磷沉积的双重信号放大电化学免疫传感器利用生物金属化所产生的Pd核进一步催化Ni-P沉积,构建双重信号放大的电化学免疫传感器。采用吸附溶出伏安法测定经HNO3溶解Ni-P沉积膜中Ni2+浓度,间接测定目标抗原的浓度。用铋纳米粒子(Bi NCs)修饰的玻碳电极作为工作电极,溶出峰电流与人免疫球蛋白G(hIgG)浓度的对数成线性关系,线性范围为0.1–100 pg/mL,检测限为0.03 pg/m L。