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目的:胰腺癌恶性度高,80%患者在确诊时已处于晚期,无法进行根治性手术。对这些患者来说,姑息性放化疗是主要的治疗方法。放射治疗是胰腺癌一项重要的姑息治疗方法。然而,内源性和获得性的放射抗性是目前胰腺癌治疗的主要障碍。以往的研究证实中药斑蝥的活性成分,斑蝥素（Cantharidin,CAN）,能抑制胰腺癌细胞生长。CAN能够使胰腺癌细胞周期阻滞在G2/M期。由于G2/M期细胞对放射线敏感,提示CAN可能具有放射增敏作用。方法:1、通过PI染色和流式细胞术分析细胞周期分布。2、流式细胞术检测γ-H2A.X,分析X射线外照射诱导的DNA双链断裂情况。3、Real-Time PCR、基因芯片检测DNA损伤修复相关基因的mRNA表达。4、应用JNK信号通路抑制剂SP600125,ERK信号通路抑制剂PD98059,PKC信号通路抑制剂GF109203X,p38 MAPK信号通路抑制剂Birb 796,NF-κB信号通路抑制剂Bay11-7082,分别阻断相应信号通路进行机制研究。5、相关性分析验证基因芯片与Real-tme PCR的相关性。6、MTT比色法检测细胞生长。结果:1、通过PI染色和流式细胞术分析发现,CAN处理后以剂量和时间依赖性性方式降低胰腺癌细胞的G0/G1期比例,并增加G2/M期细胞比例。2、免疫荧光结合γ-H2A.X染色证实,CAN能够增强X射线诱导的DNA损伤。3、基因芯片证实,CAN能够抑制UBE2T、RPA1、GTF2HH5、LIG1等参与DNA损伤修复基因的表达。4、JNK、ERK、PKC、p38 MAPK、NF-κB信号通路抑制剂预处理,可削弱甚至逆转CAN对UBE2T、RPA1、GTF2HH5、LIG1、POLD3、RMI2、XRCC1、PRKDC、FANC1、FAAP100、RAD50、RAD51D、RAD51B、DMC1表达的抑制作用。5、DNA损伤修复的机制。6、MTT比色法提示CAN能够增强X射线对胰腺癌细胞生长的抑制作用。结论:CAN能够驱动细胞脱离对放射线相对不敏感的G0/G1期,并阻滞在对放射线敏感的G2/M期,从而增强了辐射诱导的DNA损伤。另一方面,CAN通过JNK、ERK、PKC、p38 MAPK、NF-κB通路,抑制了参与DNA损伤修复的基因的表达,从而进一步增强了辐射诱导的DNA损伤,提示CAN对胰腺癌细胞具有放射增敏作用,从而有望作为放疗的增敏剂用于胰腺癌的治疗。