【摘 要】
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关节软骨损伤在运动中是一种常见的运动性损伤,由于关节软骨结构的特殊性,缺乏血管、神经等组织,导致软骨自身的修复功能有限,关节软骨为透明软骨,关节软骨损伤所引起的症状主要表现出的有关节红肿、疼痛、肿胀等,损伤加速了关节软骨功能的退变。关节损伤我们通常称之为骨关节炎(Osteoarthritis,OA)在医学领域对于如何治疗关节软骨损伤,使受损软骨修复一直是骨科领域里的研究热点,在临床上的对于关节损伤
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关节软骨损伤在运动中是一种常见的运动性损伤,由于关节软骨结构的特殊性,缺乏血管、神经等组织,导致软骨自身的修复功能有限,关节软骨为透明软骨,关节软骨损伤所引起的症状主要表现出的有关节红肿、疼痛、肿胀等,损伤加速了关节软骨功能的退变。关节损伤我们通常称之为骨关节炎(Osteoarthritis,OA)在医学领域对于如何治疗关节软骨损伤,使受损软骨修复一直是骨科领域里的研究热点,在临床上的对于关节损伤的治疗较为保守,关节损伤的症状只能在一段时间内只能减轻不能做到完全的康复,传统的治疗方法是切除坏死组织或者移植相对应的软骨组织,传统的组织修复通常是作用于纤维软骨。随着生命科学和工程科学的发展,在组织工程中干细胞治疗软骨损伤提供了新的方法,在临床中已经有了干细胞治疗的方法,目前在干细胞治疗软骨损伤方面有脂肪间充质干细胞、滑膜间充质干细胞、脐带间充质干细胞、自体软骨干细胞。1.在鸭软骨干细胞(Duck cartilage stem cells,DCSCs)的获取方法上选用机械分离法和Ⅱ型胶原酶消化法结合的方法,分离鸭胚胎胫骨的软骨部分得到软骨干细胞,把软骨干细胞通过传代分选和纯化,培养到18代,在细胞使用过程中,选用冻存复苏后细胞活性较高的细胞,通过一系列的技术手段(RT-PCR、流式细胞检测、表面特异性标记物免疫荧光检测)进行鉴定其拥有软骨干细胞的特性。2.对软骨干细胞增长和多功能分化潜能进行验证。在软骨干细胞的增长性特征方面设计细胞克隆能力形成的实验,统计绘制生长曲线;在验证软骨干细胞多功能分化潜能方面,用诱导液使软骨干细胞向成脂细胞、成骨细胞、成软骨细胞进行分化,对分化后的成骨、成脂、成软骨细胞进行RT-PCR技术和免疫组织化学技术检测相关基因的检测。表明软骨干细胞进行多功能分化,分化为目标细胞并符合目标细胞的相关特征。3.利用木瓜蛋白酶、Ⅱ型胶原酶建立小鼠膝关节软骨损伤模型,对损伤的组织结构进行石蜡包埋,做成病理切片染色后运用组织学原理进行观察,损伤软骨组织结构受损。在设计软骨干细胞治理运动损伤时,用CM-Dil细胞示踪剂标记培养的软骨卫星干细胞,直接注射到小鼠膝关节软骨损伤部位,设定7个时间梯度,每个梯度均取受损部位软骨组织和血液做石蜡病理切片、冰冻切片,观察组织形态结构、细胞示踪的变化量。研究结果表明:在治疗软骨损伤中,利用软骨干细胞可以对其进行一定的修复。本研究证实了鸭软骨干细胞治疗小鼠软骨损伤,成功的对软骨细胞进行了体外分离,并对软骨干细胞的快速增长和多功能分化潜能进行了验证,利用软骨干细胞修复小鼠软骨损伤,为干细胞促进组织再生修复提供理论基础,为干细胞治疗运动损伤的临床应用提供实验依据。
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