体外培养成骨细胞是研究骨代谢和成骨机制的重要手段,而将组织工程化骨用于骨缺损的修复是未来临床治疗的趋势所在。培养的成骨细胞多取材于动物的骨和骨膜组织,近些年来,利用具有成骨潜能的骨组织培养成骨细胞,越来越受到人们的关注。成骨细胞短柱状,有突起,核圆形,细胞质强嗜碱性。在将要形成骨组织的地方,排列成单层,彼此由突起相连。成骨细胞的主要功能是生成骨组织的纤维和有机基质。在生成有机的细胞间质以后,本身被埋于其中,变为成骨细胞。本实验目的探讨正常新生大鼠颅骨中分离培养大批成骨细胞并进行功能鉴定。方法将24h肉新生大鼠处死,在无菌条件下取出颅骨,剔净后剪成泥状,加入0.25%胰蛋白酶消化30 min,碎骨块接种于培养瓶中培养,通过观察细胞形态学及钙化结节、碱性磷酸酶染色进行鉴定。结果用胰蛋白酶-胶原酶消化法分离的大鼠成骨细胞,在体外培养时可维持其在体内的功能:合成碱性磷酸酶,最终能形成矿化结节。本实验结果显示,此方法简单、实用,并可获得足够数量的成骨细胞,通过特性鉴定,观察了其在体外培养过程中形态结构的变化,建立了体外研究骨形成、骨代谢的生物学模型,并为以后采用成骨细胞移植修复骨缺损奠定了基础。