【摘 要】
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[目的]评估编码Ⅱ型白细胞介素-1受体Ⅱ(type Ⅱinterleukin-1 receptor,IL-1RⅡ)与白细胞介素-1 受体辅助蛋白(interleukin-1 receptor accessory protein,IL-1RACP)形成的
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[目的]评估编码Ⅱ型白细胞介素-1受体Ⅱ(type Ⅱinterleukin-1 receptor,IL-1RⅡ)与白细胞介素-1 受体辅助蛋白(interleukin-1 receptor accessory protein,IL-1RACP)形成的异源二聚体对自身免疫性心肌炎的作用及其机制。[方法](一)体内实验:构建体内导入所用质粒;Day0免疫大鼠构建自身免疫性心肌炎EAM模型;Day6应用流体动力学方法进行重组质粒(IL-1RⅡ与IL-1RACP)的体内导入;分别在Day 7、Day12、、Day 17取血测定质粒浓度,Day17处死大鼠进行疗效评估,评估指标包括心脏/体重比值、组织病理学、心功能指标、炎性因子的表达。(二)体外实验:构建体外细胞转染所用质粒;在cos7细胞应用免疫共沉淀鉴定异源二聚体的形成及异源二聚体的结合部位;在大鼠心肌细胞(H9C2 cells)大鼠血管平滑肌细胞(VSMC cells)中应用实时荧光定量PCR与免疫酶联反应(ELISA)评估异源二聚体对炎症反应的影响。[结果](一)体内实验:IL-1RⅡ与IL-1RACP重组质粒同时导入大鼠体内后,血中浓度显示导入后24小时浓度最高,且维持高浓度持续实验整个过程至Day17,两种质粒同时导入组较IL-1RⅡ质粒单独导入组浓度升高8倍以上;治疗效果:两种质粒同时导入组的大鼠心脏/体重比值、BNP及炎性因子等表达均较IL-1RⅡ质粒单独导入组有明显降低,心功能得到明显改善。(二)体外实验:IL-1RⅡ与IL-1RACP重组质粒可形成异源二聚体;异源二聚体的结合部位位于IL-1RⅡ的第二功能区;异源二聚体可明显降低炎性因子(MCP-1、IL-6、TNF-α、TGF-β等)的表达。[结论]IL-1RⅡ与IL-1RACP可形成异源二聚体;其结合部位位于IL-1RⅡ的第二功能区;此异源二聚体可明显减轻EAM的炎症程度并改善心功能,这将为寻找心肌炎新的治疗靶点提供理论基础。
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