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灰树花在世界各地被广泛种植,它不仅是一种口感鲜美、肉质脆嫩、营养丰富、深受广大消费者喜爱的传统美食,还具有久远的药用历史。而多糖作为灰树花的重要营养成分,又因其具有抗氧化、抗炎、抗病毒、抗辐射、保护肝脏、免疫调节、降血糖、降血压、降血脂和抗肿瘤等一系列有利于机体健康的生物活性,得到了研究者们广泛关注。本文旨在建立一种简便高效的灰树花多糖的提取方法,并对灰树花多糖及其纯化组分的抗氧化和抗肿瘤活性及其作用机制进行研究,以期为更好地利用灰树花资源、研发灰树花多糖健康食品提供理论依据。本文主要研究结果如下:1、建立了Vc-H2O2辅助提取法提取灰树花多糖的方法,并通过单因素和响应面实验优化了工艺参数,最终最佳提取工艺为:液料比34 m L/g、Vc/H2O2浓度均为18.40mmol/L、Vc/H2O2作用温度50℃,在此条件下,灰树花粗多糖（CGFP）的提取率为14.80%,高于传统的热水提取法（8.91%）。CGFP经除蛋白得GFP,再利用DEAE-52离子交换层析柱和葡聚糖Sephadex G-100分离纯化,最终得到GFP0、GFP1和GFP3三个多糖组分,得率分别为11.64%、33.81%和4.31%（以GFP为起始原料计算）。2、GFP、GFP0、GFP1和GFP3多糖组分的总糖含量分别为72.67%、59.38%、78.56%和62.42%,四种多糖组分中均含有微量的还原糖、硫酸基、蛋白质的存在。除GFP0组分外,其余三种组分还含有少量的糖醛酸。单糖组成结果表明GFP、GFP0、GFP1以及GFP3主要由葡萄糖、半乳糖、甘露糖和岩藻糖组成。四种多糖组分傅里叶红外光谱和核磁氢谱显示,其含有α和β糖苷键。刚果红实验则表明GFP、GFP0、GFP1和GFP3中存在三维螺旋构象。3、通过测定GFP、GFP0、GFP1和GFP3的自由基清除能力以及还原力,对其化学抗氧化能力进行了评价。实验结果表明,GFP、GFP0、GFP1和GFP3对DPPH自由基清除率的IC50值分别为0.252、1.809、0.682和0.117 mg/m L;对羟自由基清除率的IC50值分别为1.652、15.779、2.684和0.918 mg/m L;对ABTS自由基清除率的IC50值分别为0.739、7.689、3.035和0.736 mg/m L;在3 mg/m L的浓度下GFP和GFP3的铁还原力强于GFP0和GFP1。4、在由H2O2诱导的巨噬细胞RAW 264.7氧化应激模型中GFP、GFP0、GFP1和GFP3表现出了显著的保护细胞抵抗氧化应激损伤。在浓度为100μg/m L的GFP、GFP0、GFP1和GFP3组中,ROS水平相较于模型组分别下降了63.11%、73.98%、103.11%和72.11%;SOD酶活力相较于模型组从6.52 U/mg prot提高至9.84、8.46、10.60和11.22 U/mg prot;CAT酶活力相较于模型组从1.51 U/mg prot提高至2.84、2.46、2.60和2.80 U/mg prot;MDA含量相较于模型组从2.14 nmol/mg prot降低至0.88、1.00、0.78和0.75 nmol/mg prot。同时发现,100μg/m L的GFP、GFP1和GFP3处理组的SOD1、CAT、HO-1、Nrf-2 m RNA的表达水平明显提高,而GFP0处理组则效果不明显。5、选择GFP1组分探究其抗肿瘤活性。MTT实验结果表明,GFP1对肺癌细胞H1975的增殖具有显著的抑制作用,且呈明显的浓度依赖关系。划痕实验、迁移实验以及侵袭实验显示GFP1对H1975细胞的迁移有抑制作用。通过Hoechst 33258染色观察,经GFP1作用的H1975细胞呈典型的凋亡形态学特征;流式细胞仪分析进一步确证了GFP1能诱发H1975细胞凋亡。GFP1处理还能使H1975细胞内ROS表达水平升高、线粒体膜电位下降、Caspase 3酶活性提高等。6、探究了GFP1处理对H1975细胞内多个基因m RNA表达水平的影响。结果表明,GFP1能显著下调胞内磷脂酰肌醇激酶（PI3K）、胞外信号调节激酶（ERK2和ERK1）、局部粘着斑激酶（FAK）和RAF1蛋白激酶的m RNA表达水平,表明抑制Ras/Raf/MEK/ERK信号通路和PI3K/Akt/m TOR信号通路可能是GFP1重要的抗肿瘤作用机制。