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慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)具有特征性的bcr-abl融合基因。本实验室成功构建表达bcr-abl基因融合区内大约472bp的融合基因片段的重组表达载体pcDNAbcr-abl,用其免疫小鼠,能在小鼠体内成功诱生针对bcr-abl融合蛋白的特异性抗体。白细胞介素-7(Interleukin-7,IL-7)能增强特异性CTL细胞活性。本课题试图分三部分研究小鼠IL-7基因对bcr-abl融合基因疫苗诱导机体免疫应答的影响。 一、bcr-abl融合基因片段和mlL-7基因双表达载体的构建与鉴定 为了给小鼠IL-7增强bcr-abl融合基因片段基因疫苗诱导特异性免疫应答的研究创造条件,我们将小鼠IL-7基因和bcr-abl融合基因片段分别插入具有两个多克隆位点的真核表达载体pVITR02-mcs,成功构建pVbcr-abl/mIL7双表达质粒。在pVbcr-abl/mIL7质粒中,IL-7基因、bcr-abl融合基因片段分别受不同的启动子调控。我们用pVbcr-abl/mIL7双表达载体转染CHO细胞,分别从蛋白表达水平和mRNA水平证实,bcr-abl融合基因片段和小鼠IL-7在真核细胞CHO中得到高效表达。bcr-abl基因片段和mIL-7基因双表达真核细胞载体的构建为慢性粒细胞白血病bcr-abl融合基因疫苗的研究提供了新的实验研究工具。 二、两种bcr-abl基因疫苗对SP2/0/bcr-abl移植瘤小鼠的影响 在构建bcr-abl基因片段和mIL-7基因双表达载体、表达bcr-abl融合基因片段的SP2/0/bcr-abl细胞的基础上,我们首先用pVbcr-abl、pVbcr-abl/mIL7两种质粒分别免疫BALB/c小鼠,然后用SP2/0/bcr-abl细胞攻击,观察疫苗对SP2/0/bcr-abl