大动脉炎(Takayasu’s Arteritis,TAK)是一种自身免疫病,自身反应性T细胞攻击大中动脉,破坏血管壁结构,导致管腔狭窄、闭塞或扩张,引发缺血。Toll样受体(Toll-likereceptor,TLR)可直接或间接调控T细胞的活化和分化。树突状细胞对T细胞的抗原提呈是间接调控的代表,在此过程中,共刺激分子协同调控T细胞的分化方向及免疫应答强度。共刺激分子包括正性共刺激分子(包括CD28、CD40L等)和负性共刺激分子(即免疫检查点,包括CTLA4、PD-1等)。本研究采用荧光定量逆转录聚合酶链反应,比较TAK不同亚组及健康对照中的基因表达水平;并对实验数据进行挖掘,以探索TAK中TLR分子、T细胞相关共刺激分子及辅助T细胞各亚群的分化之间的关联;建立TAK分子机制模型,寻找免疫调控靶点。自身免疫病可能会影响常用内参基因的表达稳定性,在第一部分研究内容中,本研究分析了人PBMC中9个常用内参基因的表达稳定性,为后续相对定量确定了内参基因。在第二部分研究内容中,通过RT-qPCR,找到了 TAK的16个差异表达基因,包括:TLR2、TLR4、p50、p65、IκBα、CD28、CD40、CTLA4、PD-1、LAG3、TCR、CD3、GATA3、RORC、FOXP3和BCL6。其中,p50、CD28、TCR、GATA3、RORC、FOXP3与TAK活动性有关。之后,对基因表达水平进行了相关性分析和聚类分析,构建了基于TAK、治疗及疾病活动性的动态基因表达相关网络,并与公共数据库进行比对。分析发现,NFKB、CD28、Th2、Th17、Treg与TAK的活动性密切相关;与p50相比,p65与T细胞的活化分化的关系更为密切;在非活动性TAK(非初治)中,多个TLR与多个T细胞活化或分化相关基因共表达,与健康对照比较,提示这是TAK的病理表现;在活动性TAK(非初治)中,PD-1/PD-L1、LAG3、T/G/T、CD40/CD40L、BCL6之间形成网络,介导TLR与T细胞活化或分化相关基因的通讯;TAK中存在“PD-1与TLR之间的关联减弱”、“LAG3低表达”、“CD40低表达”、“TIGIT功能减弱”,这些基因的下调或功能减弱,均可能会导致TLR与T细胞之间的关联减弱。这一分子机制模型为后续探究TAK中TLR与T细胞之间作用机制提供了实验证据和具体方向。