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作为植物中最大的转录因子家族之一,WRKY转录因子广泛参与植物生长发育、衰老、物质代谢和抗逆反应等多种生物进程,是调控植物多种生命进程不可或缺的一部分。其作为寄主-病原物互作中一个重要的转录调控子,是植物防卫反应信号传递网络的重要组成部分,通过正调控和负调控的协同作用,能够使植物的抗病能力广谱持久。本文通过生物信息学方法,共分析鉴定了苹果基因组上132个WRKY基因,对其基因结构和分类进行了详细的研究;选取了其中一些基因做组织表达分析;克隆了两个苹果WRKY基因,对其应对逆境胁迫响应进行了研究,并初步预测了其生物功能,具体结果如下:1.苹果WRKY转录因子分为I、II和III类型,分别有24、79和29个成员,其锌指结构类型分别为CX4CX22-23HXH、CX4-5CX23HXH和CX7CX23–24HXC,II组可进一步分为II-a、II-b、II-c、II-d和II-e亚组,分别有8、12、31、14和14个成员。苹果WRKY基因不均匀分布于17条染色体中,分布最多的有13个,最少的有4个。WRKY结构域相对高度保守,绝大多数都含有WRKYGQK七肽和锌指结构。MdWRKY基因结构进化高度保守,多数由2—5个外显子组成;其包含10个保守元件,其中1-6为WRKY盒。本研究结果表明WRKY结构域相对高度保守。2.选择42个苹果MdWRKY基因进行组织表达分析,半定量结果显示,有12个苹果MdWRKY基因在根、茎、叶、花和果中均有表达。一般情况下,基因在不同植物组织器官中的表达模式能为其功能提供线索,本研究结果表明,苹果WRKY基因参与到植物生长发育多个方面。3.检测了MdWRKY5和MdWRKY54基因表达对高盐、PEG模拟干旱、高温和低温胁迫的响应,发现MdWRKY5和MdWRKY54基因受高盐、高温和低温诱导明显;检测了MdWRKY5和MdWRKY54基因表达对SA、ABA和MeJA胁迫的响应,发现MdWRKY5和MdWRKY54基因受SA、ABA和MeJA诱导表达量出现变化,其中MdWRKY5基因受SA诱导最为明显,MdWRKY54基因受ABA诱导最为明显。本研究结果表明苹果WRKY基因可能参与到植物应对非生物胁迫当中。4.检测了MdWRKY5和MdWRKY54基因表达对苹果炭疽叶枯病菌胁迫的响应。结果发现MdWRKY5、MdWRKY54基因受病菌诱导,表达量出现了不同程度的变化,尤其是MdWRKY5基因的表达量一直增长,在48 h处达到了对照的14.6倍。本研究结果表明苹果WRKY基因可能参与到植物应对生物胁迫当中。