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目的:1.观察哮喘模型大鼠气道中肥大细胞脱颗粒现象及其所释放的介质β-类胰蛋白酶和IL-6与哮喘气道炎症的相关关系。2.观察吸入糖皮质激素——布地奈德能否减轻气道炎症、减少肥大细胞增生、保护肥大细胞膜、抑制肥大细胞脱颗粒及β-类胰蛋白酶和IL-6的释放。3.比较布地奈德与肥大细胞稳定剂-曲尼司特在哮喘防治及肥大细胞脱颗粒抑制作用上的异同。4.探讨布地奈德及曲尼司特在哮喘防治上是否存在协同作用。实验方法:1.取雄性成年SD大鼠40只,分为五组:正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、布地奈德干预组(C组)、曲尼司特干预组(D组),布地奈德+曲尼司特干预组(E组),每组各8只,观察并记录各组大鼠的情况。2.利用卵清蛋白致敏及激发来创建哮喘亚急性模型,对照组以0.9%氯化钠代替。3.药物干预组分别以布地奈德泵雾化及曲尼司特灌胃处理,对照组以0.9%氯化钠代替。4.采集血清,用ELISA方法检测血清β-类胰蛋白酶及IL-6含量;采集支气管周围肺组织标本,用Western Blot检测大鼠组织中β-类胰蛋白酶水平;HE染色进行病理学检测观察各组大鼠气道炎症情况;甲苯胺蓝染色观察各组肺组织标本中肥大细胞形态及计数;电镜下观察肥大细胞脱颗粒现象。5.并且,实验过程中意外发现曲尼司特存在损伤泌尿系统可能,故实验结束时取各组大鼠肾组织及膀胱标本行HE染色,进行病理检测以筛查有无肾脏及膀胱炎性病变。结果:1.大鼠亚急性哮喘模型的建立:随着激发次数的增加,哮喘模型组(B组)大鼠逐渐出现烦躁不安、抓耳挠腮、呼吸加快、打喷嚏、体重增长减慢等哮喘样表现。病理学检查显示明显气道炎症,嗜酸性细胞增多;肺组织与气道周围肥大细胞增多,电镜下肥大细胞脱颗粒增加。大鼠哮喘亚急性模型建立成功。2.各组肥大细胞计数:B组气道肥大细胞计数较A组明显增多,C组、D组及E组与B相比明显减少,其中E组减少最为明显,但仍多于A组,差异有统计学意义(P<0.05),C组与D组间无明显差异。3.各组电镜下肥大细胞脱颗粒变化:A组肥大细胞数量少,无明显脱颗粒现象。B组肥大细胞增生及脱颗粒表现明显,而C组、D组、E组均较B组有所改善。4.各组肺组织β-类胰蛋白酶含量比较:B组肺组织中β-类胰蛋白酶含量较A组升高明显;C组、D组和E组3组均较B组减少,其中E组减少最为明显,但仍高于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。C组及D组间无明显差异。5.各组血清β类胰蛋白酶、IL-6含量测定:B组血清中β-类胰蛋白酶及IL-6的含量较A组升高明显,C组、D组和E组3组则明显低于B组,其中E组降低最明显,但仍高于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。C组与D组之间则差异。相关性分析显示,β-类胰蛋白酶与IL-6呈正相关关系。6.曲尼司特干预组(D组)中发现膀胱炎1例,实验过程中该实验组大鼠尿量增多,喝水增多,病理结果显示:该组中一只大鼠的膀胱粘膜水肿,间质内大量炎性细胞浸润、以淋巴细胞为主,考虑为膀胱间质性炎症。结论:1.吸入糖皮质激素—布地奈德能够改善大鼠哮喘样症状、减轻气道炎症、减少肥大细胞的增生、抑制其脱颗粒并降低β-类胰蛋白酶及IL-6的释放。2.布地奈德与曲尼司特联合干预哮喘大鼠后,在实验室指标上优于单用布地奈德或曲尼司特。3.曲尼司特在一定条件下可能引起膀胱间质性炎症。