腺病毒介导CTLA-4Ig基因局部转染抑制大鼠异体复合组织移植急性排斥反应的研究

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目的:观察腺病毒介导融合基因细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(AdCTLA-4Ig)局部转染大鼠同种异体复合组织对急性排斥反应的抑制作用。方法:以近交系Brown Norway大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,采用下腹部游离皮瓣作为异体复合组织移植(composite tissue allotransplantation, CTA)模型。将受者分为3组,A组(空白对照组):异体皮瓣离体保存期间不感染腺病毒,只灌注PBS溶液;B组(阴性对照组):异体皮瓣离体保存期间灌注携带增强型绿色荧光蛋白的重组腺病毒(Ad-EGFP);C组(基因治疗组):皮瓣离体保存期间灌注AdCTLA-4Ig。术后观察各组移植皮瓣的排斥情况及存活天数,进行组织病理学检查,并观察CTLA-4Ig在移植组织中的表达情况及对急性排斥反应的抑制作用。结果:(1)A组、B组皮瓣移植物平均生存时间分别为(7.8±1.5)天和(7.1±1.6)天,C组移植皮瓣平均存活时间为(10.4±2.3)天,C组存活期长于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)移植皮瓣病理学检查:术后第7天,A组与B组移植皮瓣均发生严重急性排斥反应,而C组排斥反应较A组和B组轻微,但C组术后第11天也表现出严重急性排斥反应。(3)移植前后血清白细胞介素2(interleukin-2, IL-2)水平:各组移植术后早期发生急性排斥反应时,IL-2均有明显升高,但实验组血清IL-2水平在第3天、第7天时均明显低于两对照组(P<0.01)。(4)免疫组化:术后第5天时C组移植皮瓣局部可见CTLA-4Ig阳性表达,而A、B两组表达均阴性。结论:建立了一种新的异体复合组织移植局部基因转染模型,皮瓣灌注AdCTLA-4Ig能获得融合基因在移植复合组织中的表达,移植物局部产生的CTLA-4Ig能抑制皮瓣移植物急性排斥反应的发生,延长移植物存活时间。
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