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鸡骨香Crotoncrassifolius Geisel为大戟科巴豆属植物,以根入药,主要分布于我国南部地区及东南亚其他国家。味苦、辛,温,用于治疗胃痛、咽喉肿痛和癌症。化学成分研究显示其富含萜类成分,主要为克罗烷型二萜;药理研究表明其具有良好的抗炎、镇痛、抗胃溃疡活性,且部分萜类对多种肿瘤细胞株具有一定的细胞毒性。其所含的部分萜类对多种肿瘤细胞株具有显著的抑制作用。为进一步明确鸡骨香活性成分、寻找新的或具有良好抗肿瘤活性的先导化合物、并完善其质量控制研究,本课题对其根进行了较为系统的化学成分研究,测定了分离的萜类对肿瘤细胞增殖的抑制作用,并建立了基于多成分的鸡骨香含量测定方法。本课题综合应用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、SephadeX LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱法对鸡骨香根的甲醇提取物进行了分离纯化,共得到39个化合物,并通过IR、NMR、HR-ESI-MS、ORD、CD和X-ray单晶衍射法鉴定结构为 cracrosons D-H(1-5),l,4-methano-3-benzoXepin-2(lH)-one(6),chettaphanin I(7),9-[2-(2(5H)-furanone-4-yl)ethyl]-4,8,9-trimethyl-1,2,3,4,5,6,7,8-octahydronaphthalen e-4-carboXylic acid(8),teucvidin(9),crassifolin H(10),isoteucvin(11),crassifolin L(12),teucvin(13),crassifolin K(14),crassifolin B(15),crassifolin I(16),spiro[furan-3-(2H),l’(2’H)-naphthalene]-5-carboXylic acid(17),keto-ester(18),crassifolin A(19),crassifolin E(20),ent-kaurane-3-oXo-16a,17-diol(21),aromadendrane-4β,1 Oα-diol(22),lβ,l 1-dihydroXy-5-eudesmene(23),(1S,4S,5S,6R,7R,10S)-1,4-dihydroXy maaliane(24),aromadendrane-4β,10β-diol(25),cyperenol acid(26),cyperenol(27),taraXerol(28),acetyl aleuritolic acid(29),Lupeol(30),aleuritic acid(31),β-sitosterol(32),stigmasterol(33),ent-(16R)-16,17-dihydroXykauran-3-one(34),(+)-10α-HydroXy-1 αH,7αH-guaia-4,11-dien-3-one(35),cryptomeridiol(36),(+)-alloaroma dendrane-4β,10α-diol(37),mallotucin C(38),mallotucin D(39),结构如 Fig.2-5 所示。其中化合物 1 为新骨架二萜化合物,化合物2-5为新化合物,化合物18、21-22、24-25、34-37为首次从该属植物中分离得到。采用MTT比色法测定了化合物1-31对人肝癌Hep-G2细胞增值的抑制作用。结果表明,化合物30对Hep-G2细胞增殖表现出一定的抑制作用,IC50值为78.4± 6.1μM,而其它的化合物则未表现出明显的活性(IC50>100μM);阳性药五氟尿嘧啶对人肝癌Hep-G2细胞抑制作用的IC50值为56.3 ± 6.4μM。建立同时测定鸡骨香中6个萜类成分(chettaphanin I、teucvidin、crassifolin B、cyperenoic acid、crassifolinA、cyperenol)的HPLC方法。色谱条件:Krooasil 100-5 C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);乙腈(A)-0.02%三氟乙酸水(B)梯度洗脱,体积流量为1.0mL/min,检测波长为210nm,柱温为25。结果表明6个萜类化合物均有良好的分离度,线性关系良好(r>0.9997),平均回收率在98.48～102.50%之间,精密度、稳定该方法均简便易行、准确可靠、重现性较好,可为鸡骨香药材及其相关制剂的质性、重复性、回收率试验的RSD均小于2.00%。量控制提供科学参考。