论文部分内容阅读
溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是一种反复发作的慢性的非特异性结、直肠炎，以腹痛、腹泻、里急后重、粘液脓血便等为主要临床症状[1-3]。该病起病缓慢，病程迁延不愈，长达几年甚至数十年，症状易反复发作，是胃肠道中除恶变外最严重的疾病之一。目前，药物治疗仍然是UC的主要治疗手段。其中，5-氨基水杨酸（5-aminosalicylic acid，5-ASA）及其前药是治疗轻、中度广泛性UC的一线药物。近年来，许多实验研究证实4-氨基水杨酸（4-aminosalicylic acid，4-ASA）在UC的治疗上与5-ASA有相近的疗效，已用于不能耐受柳氮磺胺吡啶（sulfasalazine，SASP）的轻、中度UC。本论文由三章组成，分别从动物水平和细胞水平研究4-ASA和5-ASA的抗炎作用，并对两者发挥抗炎作用的作用机制进行了研究。第一章采用TNBS法诱导大鼠溃疡性结肠炎模型后，分别设正常组、模型组、SASP组、4-ASA组和5-ASA组，观察4-ASA和5-ASA对大鼠UC的治疗作用。实验结果显示：模型组大鼠疾病活动指数评分、大体评分和组织学评分均较对照组明显增高，而造模后给予SASP、4-ASA、5-ASA后，各组大鼠结肠炎症程度明显减轻，DAI评分、大体评分、组织学评分均较模型组大鼠显著减低（P＜0.05）。第二章采用脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导小鼠单核巨噬细胞（RAW264.7）炎症后，考察低（10μg/ml）、中（100μg/ml）、高（1000μg/ml）浓度4-ASA和5-ASA对炎性细胞IL-6、NO、iNOSmRNA及iNOS蛋白表达的抑制作用。实验结果显示：4-ASA：与正常组比较，模型组细胞内IL-6、NO、iNOSmRNA及iNOS蛋白表达表达均显著上调（P＜0.05）。与模型组相比，造模后给予10μg/ml4-ASA处理组的细胞内IL-6、iNOSmRNA及iNOS蛋白表达未见明显下调（P＞0.05），NO表达明显下调（P＜0.05）。造模后给予100μg/ml和1000μg/ml4-ASA处理组的细胞内IL-6、NO、iNOSmRNA及iNOS蛋白表达均明显下调（P＜0.05）。5-ASA：与正常组比较，模型组细胞内IL-6、NO、iNOSmRNA及iNOS蛋白表达表达均显著上调（P＜0.05）。与模型组相比，造模后给予10、100和1000μg/ml5-ASA处理组的细胞内IL-6、NO、iNOSmRNA及iNOS蛋白表达均明显下调（P＜0.05）。第三章采用脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导小鼠单核巨噬细胞（RAW264.7）炎症后，考察低（10μg/ml）、中（100μg/ml）、高（1000μg/ml）浓度4-ASA和5-ASA对炎性细胞JNK1/2、p38MAPK磷酸化及IκBα表达的抑制作用。实验结果显示：4-ASA：与正常组比较，模型组细胞内p-JNK1/2、p-p38及IκBα蛋白表达均显著上调（P＜0.05）。与模型组相比，造模后给予10和100μg/ml4-ASA处理组的细胞内p-JNK1/2蛋白表达未见明显下调（P＞0.05），1000μg/ml4-ASA处理组的细胞内p-JNK1/2蛋白表达明显下调（P＜0.05）。造模后给予10、100和1000μg/ml4-ASA处理组的细胞内p-p38和IκBα蛋白表达均未见显著下调（P＞0.05）。5-ASA：与正常组比较，模型组细胞内p-JNK1/2、p-p38及IκBα蛋白表达均显著上调（P＜0.05）。与模型组相比，造模后给予10和100μg/ml5-ASA处理组的细胞内p-JNK1/2蛋白表达未见明显下调（P＞0.05），1000μg/ml5-ASA处理组的细胞内p-JNK1/2蛋白表达明显下调（P＜0.05）。造模后给予10、100和1000μg/ml4-ASA处理组的细胞内p-p38蛋白表达均显著下调（P＜0.05），IκBα蛋白表达均未见显著下调（P＞0.05）。由以上三部分实验结果可以得出结论：4-ASA和5-ASA均具有明显抗炎作用，但二者发挥抗炎作用的机制有所不同。4-ASA主要通过抑制JNK1/2的磷酸化而发挥作用，而5-ASA同时抑制JNK1/2和p38的磷酸化而发挥作用。