[目的]观察化学合成的P6的抗肿瘤作用，同时观察P6对正常细胞淋巴的作用，以反映其是否有副作用。并初步探讨了P6抗肿瘤作用的可能机制。 [方法]1.细胞培养在本实验中，Hela细胞混悬于含2％FBS的RPMI1640培养液，小鼠淋巴细胞混悬于含15％FBS的RPMI1640培养液，于37℃5％CO2条件下培养。两种细胞均分为四组，于培养开始时分别给予0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL及150μg/mL的P6。Hela细胞培养168小时，小鼠淋巴细胞培养72小时。 2.淋巴细胞的活化淋巴细胞取自小鼠脾脏，并经ConA(2.5μg/mL)活化，加入不同浓度的P6(0～150μg/mL)后，培养72小时。 3.形态学观察和MTT实验Hela细胞及小鼠淋巴细胞在培养时给予P6(0～150μg/mL)。以形态学观察的方法观察细胞的形态改变，以MTT的方法检测细胞的增殖状况。 4.DNAladder检测提取经P6(0～150μg/mL)处理的Hela细胞及活化的小鼠淋巴细胞的DNA进行琼脂糖凝胶电泳，检测DNA片段的形成。 5.RT-PCR技术提取经P6(0～150μg/mL)处理的Hela细胞及活化的小鼠淋巴细胞的总mRNA，用RT-PCR的方法分析Bax基因及Bcl-2基因的转录水平。 6.流式细胞术Hela细胞及小鼠淋巴细胞在培养时给予P6(0～150μg/mL)。在培养结束时，用PI对Hela细胞及活化的小鼠淋巴细胞的DNA染色，用流式细胞术分析其细胞周期的分布。 7.化学发光分析收集经P6(0～150μg/mL)作用168小时的Hela细胞，裂解后用化学发光的方法检测其释放出的caspase-3的活性。 [结果]1.P6抑制Hela细胞增殖：形态学观察及MTT检测均证实P6可以抑制Hela细胞的增殖。流式细胞周期分析发现P6抑制Hela细胞的增殖是由于Hela细胞被阻滞于细胞周期中的S期。 2.P6促进Hela细胞凋亡：经P6作用后的Hela细胞出现明显的DNALadder。RT-PCR分析发现P6可以下调抗凋亡基因Bcl-2的表达，但对促凋亡基因Bax的表达无明显影响。流式细胞分析发现P6作用后的Hela细胞中处于sub-G1期的细胞增多。Caspase-3活性分析发现，P6可以促进caspase-3的激活。 3.P6抑制活化的小鼠淋巴细胞增殖并促进其凋亡：形态学观察及MTT检测均证实P6可以抑制活化的小鼠淋巴细胞的增殖。流式细胞周期分析发现P6抑制小鼠淋巴细胞的增殖是由于细胞被阻滞于细胞周期中的S期。小鼠淋巴细胞中处于sub-G1期的细胞增多。RT-PCR分析发现P6可以上调促凋亡基因Bax的表达，下调抗凋亡基因Bcl-2的表达。 [结论]1.以化学方法合成的P6可以抑制Hela细胞的增殖，这种增殖抑制作用是由于Hela细胞被阻滞于细胞周期中的S期。在所观察的浓度范围内，未发现P6抑制Hela细胞增殖的作用具有剂量依赖性。 2.以化学方法合成的P6可以促进Hela细胞的凋亡，在所观察的浓度范围内，未发现这种促凋亡作用具有剂量依赖性。初步证实了，P6的促凋亡作用可能是通过下调抗凋亡基因Bcl-2的表达来实现的。虽然P6不一定是caspase-3的直接激活剂，但P6促凋亡作用的发挥可能是通过促进caspase-3的激活来实现的。 3.以化学方法合成的P6在发挥抗肿瘤作用的同时也可以抑制正常淋巴细胞的活化增殖，这种增殖抑制作用是由于淋巴细胞被阻滞于细胞周期中的S期。在所观察的浓度范围内，P6抑制淋巴细胞增殖的作用具有剂量依赖性，随P6浓度增高，这种增殖抑制作用增强。 4.以化学方法合成的P6在促进肿瘤细胞凋亡的同时也可以促进淋巴细胞的凋亡，在所观察的浓度范围内，未发现这种促凋亡作用具有剂量依赖性。初步证实了，P6促进淋巴细胞凋亡的作用可能是通过上调促凋亡基因Bax的表达、下调抗凋亡基因Bcl-2的表达来实现的。这表明化学合成的P6可能存在免疫抑制的副作用。 5.以化学方法合成的P6的抗肿瘤作用还有待进一步的研究。如何选取更适合的正常细胞对照；P6在多种肿瘤动物模型中体内抗肿瘤作用的研究等。