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电化学发光(Electrochemiluminescence,ECL)生物传感器是由分子识别元件与ECL结合发展而来,是一种非常有效的检测装置。ECL具有灵敏度高、线性范围宽、分析速度快、选择性好等优点,在环境污染监测、食品安全和疾病诊断等领域应用前景广阔。本论文将具有优异化学和物理性能的功能化纳米材料引入到ECL分析体系中,借助免疫反应的高特异性,构建了灵敏、准确检测疾病标志物的新方法。首先合成了CdS-MoS2纳米复合材料、MoS2金纳米颗粒(MoS2-Au NPs)和MnCO3纳米材料,并结合酶辅助原位共反应剂生成、CuS-Ag NPs协同催化等信号放大策略,构建了灵敏检测生物标志物心肌肌钙蛋白I(cTnI)、前列腺特异性抗原(PSA)和肌红蛋白(Myo)的ECL生物传感平台。主要创新点和研究内容如下:1.基于CdS-MoS2纳米复合材料构建灵敏检测cTnI的无标记ECL生物传感器以CdS-MoS2复合材料为ECL材料,构建检测cTnI的无标记型ECL免疫传感器。采用水热法合成CdS-MoS2复合材料,将CdS-MoS2复合物、壳聚糖、cTnI抗体和牛血清白蛋白依次组装在玻碳电极表面,制备免疫传感器。在优化实验条件下,构建的“无标记型”ECL传感器,实现了对cTnI的灵敏测定。由于CdS-MoS2复合材料具有良好的ECL性能,再结合免疫反应的高特异性,该传感器对cTnI的测定具有良好的选择性和高的灵敏度。线性范围为5.0 pg/mL–100.0 ng/mL,检出限为1.0 pg/mL。将制备的传感器应用于实际样品分析,测定结果与信阳市中心医院检测结果一致,回收率为85.4%–111%,相对标准偏差(RSDs)不大于7.9%。2.基于原位生成共反应剂策略构建灵敏检测PSA的ECL免疫传感器以Au NPs修饰的MoS2(MoS2-Au NPs)为电极材料,以二抗(Ab2)和葡萄糖氧化酶标记的SiO2纳米颗粒(Ab2-SiO2-GOD)为信号探针,制备“夹心型”ECL传感平台,用于PSA灵敏检测。MoS2-Au NPs具有良好的导电性和较大的表面积,可实现快速的电子转移和大量生物分子的固定。GOD标记的信号探针可以原位生成共反应剂H2O2,增强了鲁米诺的ECL强度,实现了对PSA的灵敏分析。线性范围0.50 pg/mL–10.0 ng/mL,检出限为0.20 pg/mL。将制备的“夹心型”传感器已成功应用于人血清样品检测,与信阳市中心医院结果吻合,方法的加标回收率在90.0%–110%之间,RSD不大于6.8%。表明该方法在生物标志物的检测中具有良好的应用前景。3.基于共反应促进剂CuS-Ag纳米材料构建灵敏检测Myo的ECL免疫传感器基于MoS2负载的CuS-Ag NPs促进K2S2O8产生大量中间体SO4·-,获得增强的ECL信号,构建灵敏检测肌红蛋白(Myo)的ECL传感器。以MnCO3为发光材料,电沉积金纳米粒子促进电子传递,有效增强发光强度,层层修饰之后,将探针anti-Myo-MoS2-CuS-Ag NPs固载于传感界面。MoS2具有大的比表面积,可以负载大量的CuS-Ag NPs,CuS-Ag NPs有效产生更多的强氧化剂中间体SO4·-,增强MnCO3的ECL强度。将能提供坚固载体框架的MoS2与具有优异催化性能的CuS-Ag NPs结合起来,用于构建灵敏检测Myo的传感平台。