桑树作为重要的经济林木之一，是家蚕最适的天然饲料，具有很强的环境适应能力。干旱是常见的环境胁迫，研究桑树抗旱性的形成机理对培育抗旱新品种、提高桑树抗旱性具有重要的价值。本实验以桑的一个品种(新一之濑)为实验材料，在实现快速繁育的基础上，采用cDNA-AFLP和蛋白质双向电泳技术，分析干旱胁迫导致的桑基因表达谱和蛋白质表达谱变化，筛选出候选基因和候选蛋白，为未来的桑抗旱分子研究提供理论基础。本实验主要由三部分组成：1新一之濑组培体系的建立：利用组织培养方法来无性繁殖桑树品种，不仅可以成为桑树苗木快速繁育工厂化的手段，而且是桑树分子生物学研究的基础，为研究体系的建立提供材料。根据已报道的不同桑品种快速繁育的方案，对新一之濑的组织培养方式进行优化和探讨，筛选出了最适的培养条件。优化的培养基配方如下：芽培养基MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L；初代培养基MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L；继代培养基MS+6-BA2.0mg/L；生根培养基1/2MS+NAA1.0mg/L。2干旱胁迫下新一之濑生理和基因表达谱的变化：对桑苗进行干旱胁迫，并在胁迫的第九天复水。测量在干旱及复水过程中桑叶中叶绿素、丙二醛和脯氨酸含量的变化，发现随着干旱程度不断加深，叶绿素的含量呈下降趋势并延续到复水阶段，丙二醛和脯氨酸的积累则呈上升趋势，干旱程度越剧烈，积累速率越快，并在复水之后都有明显的含量降低。利用cDNA-AFLP技术筛选差异性表达片段，经过测序比对分析之后，发现有16条条带在NCBI数据库中存在同源序列，其中包括赤霉素氧化酶、谷胱甘肽还原酶、寡肽转运蛋白、DNA结合蛋白、核糖体RNA等基因，由于桑基因组未公布，推测这些基因与桑的干旱复水过程相关。为未来桑耐旱性的相关研究提供了候选基因。3干旱胁迫下新一之濑蛋白表达谱的变化：采用蛋白质双向凝胶电泳技术(2–DE)，分析在聚乙二醇(PEG)诱导的快速干旱下，蛋白质表达的变化。通过比对干旱组和对照组的蛋白质点，发现有45个蛋白质点发生了显著变化：与对照组相比，处理组中有25个蛋白点上调表达，包括8个特异性表达的蛋白点；20个蛋白质点下调表达，其中12个仅存在于对照组。利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF)技术鉴定差异明显的蛋白质点，结果显示其中三个蛋白质分别与过氧化物清除、蛋白代谢和生物合成有关，一个蛋白质包含保守结构域UBN2和DUF1664，UBN2结构域与核酸、锌离子结合以及结构分子的激活相关。为进一步从蛋白质水平研究桑树抗旱性形成机理奠定基础。