苦豆子总碱的毒性及HPLC法测定绵羊血浆四种苦豆子碱的研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:csuzqc
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苦豆子总碱的毒性试验通过对小白鼠灌胃苦豆子总碱得到急性中毒的症状、主要靶器官、苦豆子总生物碱的半数致死量以及苦豆子总碱主要靶器官的毒性恢复性实验。其中以Bliss法计算其半数致死量为301.75mg·kg-1.实验结果显示,苦豆子总碱的靶器官为肺脏、肝脏、肾脏、心脏和神经系统。高剂量苦豆子总碱对肺脏造成损害的恢复情况较差,脑组织、肝脏和肾脏对其造成的损害恢复情况较为理想。刺激性试验包括苦豆子总生物碱的皮肤刺激性和眼刺激性试验两部分,皮肤刺激性试验包括了单次刺激性试验和多次刺激性试验,分为两组:苦豆子总碱制剂组和苦豆子总碱透皮制剂组。添加的透皮促进剂为氮酮和丙二醇。实验结果显示低浓度苦豆子总碱对皮肤和眼睛无刺激性。添加了透皮促进剂的实验组对皮肤刺激性强度中等,主要刺激皮肤角质层的角化不全,皮肤真皮层的纤维水肿断裂,刺激小血管充血、出血。使用岛津LC-2010C液相色谱仪,建立了血浆中槐定碱、苦参碱、氧化苦参碱和槐果碱的HPLC检测方法。血浆前处理以乙腈为蛋白沉淀剂,通过紫外检测器进行检测。液相色谱的流动相为0.05moL/L的磷酸二氢钾(磷酸氢二钾调pH到6.45)和乙腈(A/B),梯度洗脱。梯度洗脱程序:0.01min-5.00min,A/B:95/5~95/5;5.00min-25.00min,A/B:95/5~88/12;25.00min-45.00min,A/B:88/12-75/25:45.00min-50.00min,A/B=75/25~95/5.检测波长225nm,流速1.0mL·min-1,检测波长225nm。对苦豆子总碱的各主要组成成分获得了良好的基线分离效果,建立了在羊血浆内检测苦豆子总碱的“高效液相色谱方法”,槐定碱、氧化苦参碱、苦参碱和槐果碱的保留时间分别为:14.904min,20.641min,28.612min,32.318min,目标生物碱色谱峰分离良好。四种生物碱线性关系良好R2>0.99,经检测四个实验组仅有苦豆子总碱透皮制剂组检测得到了有效药物浓度。本实验建立了在羊血浆内检测苦豆子内四种主要生物碱的方法。其中SRI、MT和OMT使用非经脉管模型计算其药动学各参数。实验证明苦豆子总碱外用时,药物的主要作用部位为体表和皮肤,添加透皮促进剂也仅有极小量的药物会进入全身血液循环。这与其防治家畜体外寄生虫的目的相符。
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