本研究的目的是,通过对猪小肠消化生理环境的模拟,研发一套标准化的生长猪小肠消化酶谱制剂及缓冲液试剂,并验证其体外消化的效果。为体外快速模拟猪小肠消化提供依据,也为模拟猪全消化道的消化及仿生法评定猪饲料营养价值解决关键问题。?本论文第一部分旨在通过研究4种日粮条件下生长猪空肠液组成的差异,探讨一般生产条件下,日粮蛋白质来源与水平同生长猪空肠液组成的关系。试验采用4×4拉丁方设计,将4头体重接近,安装空肠瘘管的试验猪分期、分试验猪号分别饲喂4种试验日粮(玉米-豆粕型日粮、玉米-豆粕低蛋白日粮、玉米-豆粕-棉粕-菜粕日粮和玉米-豆粕-棉粕-菜粕低蛋白日粮),通过低温离心收集食糜上清液并分析其中消化酶活性和离子浓度。结果表明,日粮蛋白质来源与水平对生长猪空肠液中胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性及钠离子、钾离子、氯离子、钙离子、镁离子与pH的影响均未达到差异显著水平(P > 0.05)。这表明,生长猪肠液中离子的含量较稳定,而酶活测值的变异受诸多其它因素影响,日粮因素并未现主导地位。日粮蛋白质水平及来源对生长猪空肠液的组成没有显著影响。?第二部分旨在研究饱和硫酸铵法与直接冻干法提取生长猪肠道消化酶活性回收率的差异,来确定一种提取消化酶的方法,为仿生消化法中模拟小肠液的配制提供高纯度、高活性的内源消化酶制剂。饱和硫酸铵法试验采用双因素完全随机设计,做6个pH 7的饱和硫酸铵溶液浓度梯度处理(30 %、40 %、50 %、60 %、70 %、80 %),直接冻干法做1个直接冻干浓缩处理。样品处理后,用自主研发的蛋白透析纯化系统低温下透析掉样品中的盐离子及部分杂蛋白,并制成冻干粉剂,计算各消化酶活性回收率和总蛋白回收率。每种方法做两个批次肠液,以考察方法的重复性。结果表明,直接冻干法提取生长猪小肠液消化酶较饱和硫酸铵法重复性好,回收率高。第三部分旨在通过比较来自生长猪空肠段的内源消化液与模拟消化液的消化性能的差异,来验证自配模拟消化液的消化活力。试验采用配对设计,以内源肠液及模拟消化液为小肠段的消化液,用单胃动物仿生消化系统模拟猪小肠段的消化功能,测定4种原料(玉米、豆粕、麸皮、棉粕)和4种日粮(豆粕日粮、麸皮日粮、棉粕日粮、花生粕日粮)的干物质及能量消化率。结果表明,内源肠液与模拟肠液测定样品的干物质消化率、能量消化率均非常相关(R2=0.9909、R2=0.9840)且各消化率间绝的对偏差也很小。这表明,自配模拟消化液与生长猪内源空肠液的消化力非常接近。?