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目的探讨冷刺激对屋尘螨诱导过敏性哮喘小鼠的炎症细胞因子和瞬时受体电位M8亚型通道蛋白(Transient receptor potential melastatin 8,TPRPM8)表达的影响及祛风宣肺汤的干预作用。方法40只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分成5组,分别为空白组、冷刺激组、屋尘螨(House dust mite,HDM)组、模型组、中药组5组,每组8只。通过屋尘螨腹腔注射+滴鼻并于激发期反复多次置入低温环境(10±3℃)构建冷刺激联合屋尘螨诱导的过敏性哮喘模型,造模同时给予中药组祛风宣肺汤水煎剂灌胃。收集小鼠支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)、外周血及部分肺组织检测 BALF 中IL(Interleukin)-4、IL-5、IL-13 及 IFN(Interferon)-γ 的表达,外周血嗜酸性粒细胞(Eosnophils,EOS)计数与血清Ig(immunoglobulin)E的水平,观察肺组织病理形态学改变,及肺中TRPM8通道蛋白的表达情况。结果(1)与空白组相比,冷刺激组小鼠BALF中IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ的水平,血液中EOS计数及血清IgE的表达均有升高趋势,但未见统计学差异;HE染色病理切片、TRPM8表达在免疫印迹法(Western blotting,WB)及免疫组化的结果中均无明显差异。(2)与空白组相比,模型组小鼠BALF中IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ的水平明显升高(P<0.0001,P<0.0001,P<0.05,P<0.0001),血液中EOS计数及血清Ig E的表达增加(P<0.01,P<0.001);病理结果显示黏膜纤毛上皮脱落不完整,肺组织肺泡间隙增厚增宽,存在大量炎性细胞浸润;WB及免疫组化结果显示肺组织中TRPM8表达增加(P<0.05)。(3)与HDM组相比,模型组小鼠BALF中IL-4、IL-5、IFN-γ水平、血液中EOS计数及血清Ig E的表达均有升高趋势,但结果无统计学差异;IL-13水平有下降趋势,结果亦无统计学差异;HE染色、WB及免疫组化结果均未显示明显差异。(4)与模型组相比,中药组小鼠BALF中IL-4、IL-5和IFN-γ的表达水平、血液中EOS计数、Ig E水平明显降低,数据有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01),而IL-13未见明显抑制优势;HE染色结果显示肺组织炎性细胞浸润减少,病变程度显著减轻;WB和免疫组化结果均显示肺组织TRPM8表达明显减少(P<0.05)。结论(1)单纯接触冷刺激不会引发哮喘,而在哮喘基础上施加冷刺激有加重哮喘的风险。(2)祛风宣肺汤可以下调小鼠肺组织TRPM8蛋白表达,调节2型免疫反应,改善肺组织炎性浸润而达到缓解过敏性哮喘的作用。