根结线虫病在设施蔬菜生产中普遍发生,高产、连作、多样化的种植布局导致棚室内根结线虫病的危害日趋严重,造成不同程度损失,轻者减产10%左右,重者达60%以上,有时甚至绝收。目前在设施蔬菜生产上,防治根结线虫病主要依赖化学防治,但是化学杀线剂通常毒性较大,有残留、残毒、污染环境等问题,因此生物防治设施蔬菜根结线虫病的研究课题受到国内外植保专家的高度关注。本文主要通过设施大棚药效试验,探明本实验室前期探究筛选得到的生防菌解淀粉芽孢杆菌B1619(Bacillus amyloliquefaciens)对设施蔬菜根结线虫病的防治效果;通过室内毒力试验,测定解淀粉芽孢杆菌B1619对蔬菜根结线虫的毒杀效果。设施大棚药效试验结果表明:一般情况下,沟施的田间防效高于穴施;当施用菌粉量较少时,穴施田间防效高于沟施;当每棵设施番茄和黄瓜施用解淀粉芽孢杆菌B1619总量为16g时,其防效分别为69.12%和87.77%。室内毒力测定试验结果表明:甲基异柳磷对2龄线虫的EC50(24h)为46.4240 mg/L,EC50(48 h)为33.2889 mg/L;解淀粉芽孢杆菌B1619发酵液对2龄线虫的EC50(24 h)为 6.9×108 CFU/mL,EC50(48h)为 5.7×108CFU/mL;解淀粉芽孢杆菌 B1619 粗提物对2龄线虫的EC50(24 h)为稀释5.1217倍,EC50(48 h)为稀释5.6922倍。室内外试验结果均表明B1619对设施蔬菜线虫病有明显的防治效果。前人研究表明生防菌能激发植物的诱导抗病性信号通路,提高植物的抗病能力,诱导抗病性也是主要的植物抗病机制之一。本文也探讨了解淀粉芽孢杆菌B1619诱导番茄植株在不同时段防卫反应基因的表达含量差异以及抗氧化酶的活性差异。试验以B1619菌液、病原线虫单独以及同时处理番茄植株,检测了不同处理在0h、8 h、24 h、48h、96h时,番茄叶片中防卫反应相关基因PR1和PAL2的相对表达量,以及0 h、24h、48 h、96h、144h、168 h 时,抗氧化酶系 SOD、POD、CAT 的活力。试验结果表明生防菌B1619和病原线虫同时处理植株时,番茄叶片中防卫反应相关基因的相对表达量及抗氧化酶活力均有变化,其中48h时,基因PR1的相对表达量是对照的6.0倍;144 h时,基因PAL2的相对表达量是对照的3.3倍;24 h时SOD与CAT活力均达到最大值,分别是对照的1.3和1.5倍;48h时POD活力达最大值,是对照的1.3倍。研究结果表明解淀粉芽孢杆菌B1619能够诱导番茄植株防卫反应相关基因PR1和PAL2的表达以及抗氧化酶SOD、POD、CAT活性的变化,从而增加了番茄抵御病原物侵入、蔓延的能力。解淀粉芽孢杆菌B1619对设施蔬菜根结线虫病有较好的防治效果。为了提高菌株B1619生物发酵效率,本文通过单因子水平筛选和正交试验,对菌株B1619发酵培养基和培养条件进行了优化。试验结果表明,发酵培养基3个主要因子的最佳配比组合为酵母膏0.25%,大豆粉2.00%,生长素0.05%,优化后生物发酵效率比初始培养基提高了 21.79%;发酵培养条件3个主要因子的最佳组合为温度28 ℃,转速180r/min,装液量60mL/250mL,优化后生物发酵效率比初始培养条件提高了 35.42%。经验证,优化后的生物发酵工艺获得的发酵菌液含菌量为7.13×109CFU/mL,与初始发酵工艺的发酵菌液含菌量(3.80×109CFU/mL)相比,提高了 87.83%,优化效率十分显著。