研究背景与目的近几年,越来越多的研究者认识到人类恶性肿瘤遗传学改变的重要性,对恶性肿瘤遗传学改变的研究能够在基因水平上解释肿瘤的发病机制,更有利于相关恶性肿瘤的诊断,针对遗传学异常的靶向治疗给肿瘤患者带来更多长期生存的机会。目前,在急性白血病中已经发现了许多遗传学改变,包括基因缺失、基因突变、基因扩增及基因易位等各个方面,已经可以在基因水平了解一部分急性白血病致病原因,由此产生的基因靶向治疗如RAN干扰技术等已经得到了明显的治疗效果。间变性淋巴瘤激酶(ALK)基因是重要的肿瘤相关基因,在许多恶性肿瘤中存在ALK基因的异常,包括间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)、非小细胞型肺癌(NSCLC)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、炎性肌纤维母细胞瘤(IMT)及神经母细胞瘤(NB)等,ALK基因异常引起的细胞增殖过度和凋亡下调是其主要致瘤原因。核仁磷酸蛋白(NPM)基因是一种研究较多的具有癌基因及抑癌基因双重生物学功能的基因,参与许多恶性肿瘤的形成,包括膀胱癌、乳腺癌、肺癌和淋巴瘤等实体瘤,也包括急性髓系白血病(AML)和骨髓增生异常综合征(MDS)这两个血液系统恶性肿瘤,最近,研究者们更加关注NPM基因对急性白血病的影响。NPM基因异常导致肿瘤发生的原因与其自身的生物学特性密切相关,包括参与核糖体组装和运输、分子伴侣功能及调节重要的抑癌因子折特点。在ALCL中最常见的嵌合体基因是NPM-ALK融合基因,当前,研究者们基本明确了NPM-ALK融合基因引起ALCL主要原因,NPM-ALK融合基因检测已经应用在ALCL的诊断及预后判断上,针对NPM-ALK融合基因及融合蛋白的靶向治疗也得到了预想的成果。目前,国外仅有报道显示在极少数急性粒单核细胞白血病(AML-M4)中存在ALK基因易位,尚无关于ALK基因在其他类型儿童急性白血病中表达情况的报道,NPM-ALK融合基因在血液系统肿瘤中的表达也仅在淋巴瘤中发现,本研究旨在检测急性白血病、淋巴瘤白血病患儿中ALK基因、NPM-ALK融合基因表达情况,探讨ALK基因、NPM-ALK融合基因在急性白血病发病中是否发挥作用。研究方法1收集2008年9月～2010年5月在郑州大学附属第一医院儿科血液病区初诊为急性白血病患儿的骨髓液,包括急性淋巴细胞白血病、急性髓系细胞白血病和淋巴瘤白血病。正常对照组为儿童正常骨髓液。2采用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测ALK基因及NPM-ALK融合基因,实验步骤：骨髓液的采集、骨髓液的处理、总RNA的提取、cDNA的合成及PCR试验。3统计学处理：采用SPSS 17.0 for Windows软件包进行统计学处理,实验RT-PCR产物阳性样本总数用例数(n)表示,实验组与正常对照组的比较采用独立两组二分类定性资料的卡方检验(x2),统计检验标准均为双侧概率检验(a=0.05), P<0.05表示差异具有统计学意义。结果1实验组检测结果：(1)急性T细胞淋巴细胞白血病组结果显示,ALK基因及NPM-ALK融合基因表达均为阴性。(2)急性B细胞淋巴细胞白血病组结果显示,ALK基因及NPM-ALK融合基因表达均为阴性。(3)急性髓系白血病组结果显示,ALK基因及NPM-ALK融合基因表达均为阴性。(4)淋巴瘤白血病组结果显示,ALK基因及NPM-ALK融合基因表达均为阴性。2正常对照组检测结果显示ALK基因及NPM-ALK融合基因表达均为阴性。结论1本实验未发现儿童急性白血病中存在ALK基因及NPM-ALK融合基因的表达,ALK基因及NPM-ALK基因可能仅是ALCL、DLBCL的特异性基因,在急性白血病中不发挥致瘤作用。2鉴于以往研究已经证实,ALK基因及NPM-ALK融合基因在大部分间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)和弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中表达,因此检测ALK基因、NPM-ALK融合基因对于ALCL、DLBCL有直接诊断意义,并可以用于鉴别急性白血病与ALCL、DLBCL所致的淋巴瘤白血病。