牵牛子提取物对果园朱砂叶螨生物活性的研究

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本试验以严重为害果树的朱砂叶螨为研究对象,对牵牛子进行了杀螨活性成分研究,并对分离出来的有效物质进行了作用机理初步探讨。(1)采用玻片浸渍法室内测定了36种中草药提取物对朱砂叶螨的杀螨活性,结果表明:牵牛子石油醚提取物等10种中草药提取物的活性较高,其24h校正死亡率均大于90%;并对上述10种具有较高杀螨活性的中草药提取物对朱砂叶螨的触杀效果也进行了测定,按LC50从低到高依次为:牵牛子石油醚提取物(0.6979±0.0598mg/ml)、马钱子石油醚提取物(0.7670±0.0554mg/ml)、苍耳子石油醚提取物(1.1239±0.0615mg/ml)、苍耳子甲醇提取物(1.3417±0.0773mg/ml)、马钱子甲醇提取物(1.3492±0.0738mg/ml)、百部石油醚提取物(1.3679±0.0810mg/ml)、红藤石油醚提取物(1.4863±0.0921mg/ml)、贯众氯仿提取物(1.6347±0.1060mg/ml)、白鲜皮氯仿提取物(1.7185±0.1003mg/ml)、贯众甲醇提取物(1.8201±0.0934mg/ml),结果表明牵牛子石油醚提取物的杀螨活性最高。(2)测定牵牛子提取物对朱砂叶螨的生物活性。牵牛子石油醚提取物浓度为2mg/ml时,对朱砂叶螨的雌成螨和卵的校正死亡率分别达到93.7%和77.3%,LC50分别为0.6979mg/ml和1.3037mg/ml;对雌成螨24h后的产卵抑制率和驱避率分别达到82.51%和94.54%。萃取物中石油醚相的活性明显高于甲醇相,浓度为2mg/ml时,石油醚萃取物以朱砂叶螨的雌成螨和卵的校正死亡率分别达到96.2%和82.1%,LC50分别为0.5042mg/ml和1.1016mg/ml;对石油醚萃取物进行柱层析分离最终得到流分12个,其中以流分8杀螨效果最好,浓度为2mg/ml时,24h对雌成螨的校正死亡率达96.4%。流分8对成螨和卵的LC50分别是0.4477mg/ml和1.1971mg/ml,LC90分别是2.2321mg/ml和2.9152mg/ml。(3)研究牵牛子石油醚提取物中流分8对朱砂叶螨生物活性的作用机理。采用叶片残毒法观察流分8对朱砂叶螨的中毒症状,并采用生化方法测定了谷胱甘肽-S-转移酶、乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Ca2+-ATP酶活性的影响,通过透射电镜观察流分8对螨体内亚显微结构的破坏。结果表明,牵牛子流分8处理朱砂叶螨后,螨体内解毒酶谷胱甘肽-S-转移酶被激活,这说明流分8中存在对朱砂叶螨有毒的物质;而乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Ca2+-ATP酶均受到不同程度的抑制,这可能引起神经传递的阻断,从而导致螨体的死亡。透射电镜下可见,流分8对螨体内表皮结构、肌纤维、细胞核膜、线粒体、内质网等均有不同程度的破坏。牵牛子可以有效杀死朱砂叶螨,作为新型植物源农药具有良好的开发前景。
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