芳香烃降解菌的分离、鉴定及性质研究

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多环芳烃(Polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)是在自然环境中广泛存在且对生态环境和人类健康有很大危害的一类污染物,已被世界许多国家列为优先控制的污染物。在PAHs的各种降解方法中,生物修复由于成本低、应用范围广、对生态无害等诸多优点,因此也是降解PAHs最有效的方法之一。萘(Naphthalene)是由两个苯环构成的有机物,在自然环境如空气、水、土壤中广泛存在,是最典型的PAHs代表物。本文从大庆油田污染土壤中采集样品,通过富集分离培养,得到一株芳香烃降解菌株DQ-1,经过一系列形态学实验、生理生化试验和16Sr DNA序列同源分析,鉴定该菌株为施氏假单胞菌属(Pseudomonas sp.)其同源性为99%,命名为Pseudomonas sp.DQ-1。对分离得到的芳香烃降解菌的生长条件和影响萘降解率的因素进行实验研究,通过单因素实验得到了菌体的最佳生长条件和萘的最佳降解条件,优化后萘的降解率在3d后能达到96.5%,充分发挥了菌株对萘的降解能力。对菌株DQ-1进行重金属耐受性的研究,探讨了菌株耐受重金属的能力。结果表明,菌株DQ-1能在一定浓度的Fe3+、Zn2+、Pb2+、Cu2+和Cr6+生长良好,在一定浓度的Fe3+、Zn2+或Pb2+条件下保持对萘较高的降解率。通过直读电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES,美国VARIAN公司)测定培养体系中重金属离子的含量得到重金属离子最终吸附在菌株细胞表面。之后对菌株DQ-1进行了实验室室内土壤修复模拟实验。在灭菌土壤中,菌株DQ-1经过11d的室内培养后,对萘的去除率达到97.9%。说明该菌株有较好的实际应用价值。为了克服单一菌株对萘降解的局限性,选择混合菌研究其对萘降解性能。探讨了菌株DQ-1与另一株伯克霍尔德氏菌TN的协同作用。结果表明,混合菌在优化后对萘的降解浓度由单一菌株的3g/L提高到5g/L,2d后的降解率超过80%。在灭菌土壤里,混合菌经过7d的培养,萘的去除率高达95.9%,降解周期较单一菌株缩短4d。这也说明充分利用菌株之间的协同降解作用可以达到更好的生物修复效果。
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