共振瑞利散射光谱在多糖分析中的应用研究

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共振瑞利散射(RRS)是一门新兴的分析技术,因其高灵敏度和简易性而引起人们广泛关注。RRS法是利用生色团在生物大分子上的聚集作用和小分子之间静电引力、疏水作用力和电荷转移作用形成的离子缔合物产生强烈的RRS光谱来进行检测的,它已用于核酸、蛋白质等生物大分子的研究,并用于痕量无机离子,有机物的测定。RRS法具有很高的灵敏度,在生命科学、环境科学以及纳米材料研究等方面都有良好的应用前景。本论文分为两部分,第一部分是文献综述,主要介绍了共振瑞利散射技术及其发展和多糖的药理作用和常用分析方法。第二部分是研究报告,报道了用共振瑞利散射光谱法分析和测定两种多糖,主要内容如下:一、共振瑞利散射光谱法测定葡聚糖硫酸钠1、碱性三苯甲烷染料乙基紫共振瑞利散射光谱法测定葡聚糖硫酸钠在Britton-Robinson缓冲介质(pH 9.0~10.5)中,单独的乙基紫与葡聚糖硫酸钠的共振瑞利散射都非常微弱,当二者反应形成粒子缔合物时将导致溶液共振瑞利散射明显增强,并产生新的共振瑞利散射光谱,其三个明显的散射峰分别位于348.0 nm、509.8 nm和680.0 nm处,且均可作为测定波长。以ΔI值最高且线性关系较好的509.8nm作为测定波长时,葡聚糖硫酸钠在0.005~2.4μg·mL-1范围内与共振瑞利散射强度成线性关系,检出限为3.25 ng·mL-1。讨论了溶液酸度、乙基紫浓度、反应时间、温度、离子强度等实验条件,考察了共存物质对该体系测定葡聚糖硫酸钠的影响。实验表明该方法有较高的灵敏度,应用于合成样品的测定,结果令人满意。2、阳离子表面活性剂溴化十六烷基吡啶共振瑞利散射光谱法测定葡聚糖硫酸钠在Britton-Robinson缓冲介质(pH 6.0)中,单独的葡聚糖硫酸钠和溴化十六烷基吡啶的共振瑞利散射都非常微弱,但当两者反应形成离子缔合物后却导致RRS显著增强,并产生了新的共振瑞利散射光谱,葡聚糖硫酸钠在0.01~2.8μg·mL-1范围内与RRS强度成线性关系,由此建立了一种测定DSS的新方法。该方法灵敏度高,检出限9.85ng·mL-1。本实验研究了适宜的反应条件和影响因素,考察了共存物质的影响,结果表明该方法有高的灵敏度。二、共振瑞利散射光谱法测定硫酸皮肤素1、硫酸皮肤素和某些吖啶染料缔合物微粒体系的共振瑞利光谱研究在适宜pH条件下,硫酸皮肤素可以和某些吖啶染料作用形成缔合物时将导致溶液共振瑞利散射明显增强并产生新的RRS光谱。以硫酸皮肤素-吖啶橙为研究体系,其最大散射峰位于515.6nm处,硫酸皮肤素在0.01~6.0μg·mL-1范围内与RRS强度成正比。该方法灵敏度高,检出限为8.7 ng·mL-1。研究了适宜的条件和影响因素,考察了共存物质的影响,应用于合成样品的测定,结果令人满意。2、碱性吩噻嗪染料甲苯胺蓝共振瑞利散射光谱法测定硫酸皮肤素在pH 5.6的实验条件下,甲苯胺蓝与硫酸皮肤素作用形成结合产物时将导致溶液共振瑞利散射明显增强并产生新的RRS光谱,其最大散射峰位于356.0nm处,研究了适宜的条件和影响因素。硫酸皮肤素在0.1~4.0μg·mL-1范围内与RRS强度成正比;检出限为8.5×10-2μg·mL-1。考察了共存物质的影响,实验证明该方法有较好的选择性和灵敏度,应用于合成样品的测定,结果令人满意。
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