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目的：观察不同方法控制性降压对大鼠脑海马A8、S-100β表达和学习记忆的影响,研究围术期控制性降压对术后认知功能障碍的影响和可能机制。
方法：运用Y-型电迷宫测试,记录大鼠训练后测试正确反应率(right number,RN)和全天总反应时间(total reaction time,TRT),计算其均值,筛选学习记忆功能正常的雄性SD大鼠128只。随机分为四组：对照组(A组),异氟烷Ⅰ组(B组),异氟烷Ⅱ组(C组),异氟烷+硝普钠组(D组),每组32只大鼠。分四个时间点：麻醉后即刻(A组为麻醉前)、麻醉后1、3、7天,以下标0、1、3、7表示,各取8只大鼠。上述四组分别于行水合氯醛腹腔注射麻醉后,套管针气管插管,动物呼吸机控制呼吸,使用动物无创血压测试仪监测大鼠尾动脉血压,待血压稳定20分钟(min)后开始降压。A组不做降压处理,采用0.9％氯化钠注射液连续泵注;B组0.9％氯化钠连续泵注,1-1.5％异氟烷吸入麻醉,血压维持在大鼠正常生理范围,持续4小时(h),麻醉后即抽取动脉血0.6ml行血气分析;C组0.9％氯化钠连续泵注,3～4％异氟烷吸入10～15min达到目标血压,即MAP50mmHg,控制性降压持续4h,降压结束后即抽取动脉血0.6ml行血气分析;D组0.9％氯化钠液配制成400μg/ml硝普钠(SNP),1～1.5％异氟烷吸入麻醉,10～15min达到目标血压,即MAP50mmHg,降压过即程中根据血压变化调整泵速,控制性降压持续4h,降压结束后即抽取动脉血0.6ml行血气分析。上述四组采用白炽灯直接照射大鼠,保持肛温37.0±0.5℃。控制性降压组术后即刻断颈取脑海马组织(n=8)、控制性降压术后1(n=8)、3(n=8)、7(n=8)天利用Y迷宫进行认知功能的测定,测试后各时间点随机取4只大鼠断颈取脑海马组织-70℃冻存,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验,检测海马内A8抗体表达水平;4只以4％多聚甲醛150-200ml灌注固定后颈取脑海马组织,采用免疫组化观察S-100β免疫反应阳性细胞表达并进行阳性细胞计数。
结果：麻醉前四组大鼠生理指标和学习记忆功能组间无显著性。①麻醉后1天正确反应次数为：B112.43±3.29次、C18.39±2.87次、D110.89±3.65次,小于A1组13.64±2.76次;全天总反应时间为：B174.83±44.37秒、C193.38±51.35秒、D181.41±43.24秒,大于A168.42±33.27秒。麻醉后3天、7天四组间正确反应次数和全天总反应时间无显著差异。②麻醉后即刻Aβ抗体：C00.097±0.0045,明显高于B00.072±0.0073、D00.07±0.0055、A00.068±0.0062;麻醉后1天Aβ抗体C10.098±0.0075,明显高于A10.066±0.0069、B10.073±0.0052、D10.075±0.0057,差异有非常显著性,A1、B1、D1组间无显著差异(P＞0.05);麻醉后3天、7天四组Aβ抗体组间无显著差异。③麻醉后即刻C0组大鼠海马各区S-100β阳性细胞均明显增多,密度高于A0、B0、D0组,差异有非常显著性,A0、B0、D0组密度无显著差异;麻醉后1天C1组海马各区S-100β阳性细胞均明显增多,密度明显高于A1、B1、D1组,差异有非常显著性,A1、B1、D1组间无显著差异(P＞0.05);麻醉后3天、7天B、C、D组海马各区S-100β阳性细胞密度降低,四组间无显著差异。
结论：
1.以单纯吸入3-4％异氟烷4小时控制性降压,影响大鼠脑海马Aβ及S-100β的表达水平,对其认知功能产生一定影响。
2.异氟烷+硝普钠用于控制性降压安全可行,对大鼠认知功能没有明显影响。