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一、目的颅脑损伤是神经外科最常见的疾病之一,严重危害人民的健康,已成为年轻人死亡的重要原因之一。继发性脑损伤是颅脑损伤患者致死、致残的主要原因,但其发病机制尚未完全阐明。脑损伤可引起脑微血管改变和微循环障碍,从而导致继发性脑缺血、水肿。在这个过程中,作为微血管的构成基础,脑血管内皮细胞发挥了很重要的作用。本实验旨在观察大鼠脑外伤后脑血管内皮细胞活化标志物vWF和TM的表达变化及微血管的超微结构改变,探讨颅脑损伤后继发性脑损害的分子机制及EGB的干预作用,为临床治疗提供理论依据。二、方法第一部分:将140只SD大鼠随机分为两组:标准对照组和打击组,每组70只。标准对照组只切开皮肤,不作打击;打击组参照Mamourous自由落体致伤法制作大鼠闭合性颅脑损伤模型。分别于脑外伤后1小时、4小时、8小时、12小时、24小时、3天、7天从两组中随机取标本10只,其中5只应用HE染色法观察各时段皮层脑组织病理变化,采用免疫组化方法,观察阳性免疫染色血管;另5只取一侧部分皮层脑组织采用实时荧光定量PCR方法检测vWF和TMmRNA的相对表达,部分用3%戊二醛固定,超薄切片行电镜检查。第二部分:将140只SD大鼠随机分为两组:打击对照组和打击治疗组,每组70只,两组均参照Mamourous自由落体致伤法制作大鼠闭合性颅脑损伤模型。分别于脑外伤后1小时、4小时、8小时、12小时、24小时、3天、7天从两组中随机取标本10只,其中5只应用HE染色法观察各时段皮层脑组织病理变化,采用免疫组化方法,观察阳性免疫染色血管;另5只取一侧部分皮层脑组织采用实时荧光定量PCR方法检测vWF和TMmRNA的相对表达。三、结果成功建立Mamourous大鼠闭合性颅脑损伤模型;肉眼可见广泛的蛛网膜下腔出血;光镜下可见脑皮质挫伤,坏死和水肿,血栓形成,周围神经元变性;电镜下可见血管内皮细胞细胞核边集,皮层微血管管腔内血小板堆积,管腔表面不平整,血管周围间隙增宽,基质变淡,内有胞浆成分;vWF和TM蛋白及mRNA的表达于伤后4h开始显著升高,24小时达到高峰,随后逐渐降低,7天后接近正常。治疗组4h-3d的免疫阳性染色血管数目较多,染色程度较深, vWF和TM蛋白及mRNA的表达显著低于同时间点对照组,存在显著性差异(P<0.05)。四、结论颅脑损伤早期即存在脑微血管内皮细胞功能和结构的改变,且逐渐加重,至伤后24h达到顶峰,伤后7d基本恢复正常,是诱发微循环障碍的主要因素,与继发性脑缺血、脑水肿关系密切;针对脑微血管内皮细胞活化的治疗可望有效改善早期微循环、防止或减轻继发性脑损伤,改善TBI患者预后;颅脑损伤早期应用银杏叶提取物可明显抑制脑血管内皮细胞的活化,改善微循环,同时具有神经保护功能,有望成为临床早期治疗颅脑损伤新的选择。