本论文对大肠杆菌菌体抗原的制备、鸡体免疫、卵黄抗体的制备方法及其特性进行了系统研究。该研究为卵黄抗体在疾病治疗与控制，免疫学检测诊断方面的进一步开发和利用提供了基础。　　 试验以大肠杆菌E.coli为对象，在牛肉膏蛋白胨培养基中活化扩培，1.19×109CFU/ml的菌悬液100℃煮沸灭活，与佐剂1:1混合后进行免疫。采用双翅皮下与胸部肌肉四点注射，每只鸡1ml，隔10天加强免疫，共免疫4次。卵黄中IgY效价采用间接ELISA方法测定，最高达1.6×105。　　 卵黄抗体的提取研究了三种方法。①水稀释法，卵黄液用水稀释10倍，用5万分子截留量的超滤膜超滤浓缩不同倍数，确定了4～5倍为最适浓缩倍数，再用45％饱和度的硫酸铵进行盐析。本方法IgY回收率为44.8％，IgY纯化倍数为3.54，每克蛋白中IgY活性为853000。②辛酸法，卵黄液中滴加1％、3％、6％的辛酸，确定最适辛酸浓度为3％，再滴定45％饱和度的硫酸铵沉淀IgY，该方法IgY回收率为60.7％，IgY纯化倍数为2.38，每克蛋白中IgY活性为672000。⑧聚乙二醇法，卵黄液中添加3.5％的PEG6000提取IgY，再向提取液中继续添加PEG6000使其终浓度分别为5.5％、6.5％、8.5％、10.5％、12.5％，确定8.5％浓度为最佳浓度。该方法IgY回收率为80.7％，IgY纯化倍数为2.76，每克蛋白中IgY活性为392000。　　 比较三种提取方法的优劣。安全方面，水稀释法和聚乙二醇法优于辛酸法，无污染，不添加任何有毒物质。工艺和回收率方面，聚乙二醇法是最好的方法，该法流程最简单，时间最短，回收率最高。在规模和纯度方面，水稀释法适合大量生产IgY，获得的纯化倍数最高。　　 研究了离子交换色谱和凝胶过滤两种纯化方法。离子交换色谱法摸索了不同pH缓冲液、流速、洗脱方式对分离效果的影响，结果该法未能将杂蛋白与IgY很好分离。凝胶过滤法研究了样品处理方式对分离效果的影响，结果经过45％硫酸铵一步盐析和50％硫酸铵与30％硫酸铵二步盐析的沉淀样品，都可在丙烯葡聚糖凝胶柱上实现抗体IgY的有效分离，所得抗体蛋白含量分别为1.069mg/ml、0.609mg/ml，纯度分别为92％、98％，效价分别为12800、6400。　　 卵黄抗体特性的研究。抗大肠杆菌IgY具有较强的特异性，与大肠杆菌O157:H7、金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)、四联球菌(Micrococcus tetragenus)的交叉反应小。IgY具有一定的耐热性、耐酸碱性及良好的贮藏稳定性，在温度＜70℃及pH2.0～10.0时IgY能保持较高活性，反复冻融10次，IgY活性变化不大。IgY和IgG对胃蛋白酶都敏感，且随着时间的增加而增加，pH的降低而增加。比较而言，IgY对胃蛋白酶的敏感性高于IgG。　　 本论文成功从卵黄中制备出抗大肠杆菌特异性抗体并对抗体特性进行了考察，为抗体的应用与开发提供了依据。