钙载体诱导CML细胞分化成树突状细胞的实验研究

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目的:研究钙载体(CI A23187)诱导慢性髓性白血病(CML)细胞分化成树突状细胞(DCs)的作用;了解诱导产生的DCs P210蛋白的表达及其刺激自身T细胞产生针对CML细胞的细胞毒作用。方法:用CI和粒-单集落刺激因子(GM-CSF)联合诱导CML病人骨髓来源的单个核细胞,通过倒置显微镜和电镜观察细胞的形态变化和超微结构,用流式细胞仪检测细胞表面分化抗原的变化和变化过程;通过蛋白免疫印迹实验(Westernblot)来检测CML特异的肿瘤标志物P210蛋白在DCs中的表达;通过乳酸脱氢酶(LDH)实验来评估CI诱导的DCs刺激自身T细胞产生抗CML细胞的细胞毒作用。结果:CML细胞经CI和GM-CSF联合诱导96小时后在倒置显微镜和电镜下观察到有典型的DCs的形态形成;流式细胞仪检测显示CD83、CD86、CD80、HLA-DR、CD40等表面分化抗原的表达显著提高;蛋白免疫印迹实验表明生成的DCs有P210蛋白的表达,但与未经诱导的CML单个核细胞比较,用CI和GM-CSF联合诱导生成的DCs其P210蛋白表达水平降低;乳酸脱氢酶实验表明这些DCs刺激的自身T细胞对CML细胞的杀伤率显著高于用CML细胞刺激的自身T细胞。结论:CI和GM-CSF联合能快速诱导CML细胞分化成DCs,这些DCs表达CML细胞特异的肿瘤标志物P210蛋白,但其表达水平较未经诱导的CML
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