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【目的】 旨在通过体外扩增培养大鼠未成熟DC,体内输入受体,了解小肠移植后免疫耐受诱导情况,为减轻临床小肠移植后强烈的免疫排斥反应提供新的思路和途径。 预期目标:(1)大鼠未成熟DC体外培养扩增条件;(2)大鼠未成熟DC细胞诱导小肠移植免疫耐受的可行性;(3)大鼠供、受体未成熟DC诱导大鼠小肠移植免疫耐受的异同:(4)骨髓来源和肝脏来源的未成熟DC诱导大鼠小肠移植免疫耐受的异同。 【方法】 成年雄性近交系SD大鼠、Wistar大鼠(共体或受体),分离大鼠股骨骨髓细胞,加大鼠来源细胞因子粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage colony,GM-CSF)或粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子+转化生长因子β1(transforming growth factor betaone,TGF β1),培养5～9天收集骨髓来源DC。经门静脉插管胶原酶二步循环灌流法及Percoll不连续密度梯度离心法分离肝源DC,加细胞因子GM-CSF/或GM-CSF+TGF β1,培养5～9天收集肝脏来源DC。DC培养不同时间通过光镜观测、扫描电镜观测、流氏细胞术(FCM)检测DC表型、四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测DC刺激同种异体大鼠淋巴细胞增殖能力来判定DC的成熟状态及功能。将收集的不同细胞因子培养的骨髓和肝脏来源的未成熟DC经阴茎背静脉输入受体Wistar大鼠体内(2×10~8细胞/只),1周后建立SD→Wistar同种异基因大鼠并列式小肠移