背景与目的：　　甲状腺癌是最常见的内分泌恶性肿瘤，在与内分泌有关的癌症死亡患者中占绝大多数。大多数甲状腺癌（乳头状和滤泡型）来自具有良好分化表型的滤泡性上皮，因此甲状腺切除术具有良好的预后。然而，未分化型甲状腺癌(Anaplastic thyroid cancer，ATC)尽管发病率低（约占总甲状腺癌病例的2％），但其以很强的侵袭性迅速增长，导致ATC患者癌症转移不久就发生死亡。为了防止肿瘤复发，国内外众多研究者已经采用了术后放疗、化疗或其组合疗法进行肿瘤治疗。维甲酸(Retinoic acid，RA)具有很强的促分化能力，目前在临床上常被用作诱导分化的药物，用于增强ATC患者的放疗敏感性。但根据临床数据显示，该治疗方案的结果不完全相同。基于RA的再分化治疗已经在临床上应用，因此需要迫切谨慎地评估RA在ATC治疗中的适用性。　　RA已被用于通过促进放射性碘吸收的方式来克服甲状腺癌的放射性碘抗性。然而，如上所述，治疗后果是完全不同的。RA信号传导可以通过两种经典途径，分别由CRABP-Ⅱ作为癌抑制和FABP5作为促癌途径转导。然而，目前还没有关于这两个RA相关因子在未分化型甲状腺癌体内外表达模式的研究报道。　　因此，本研究旨在阐明导致ATC细胞对RA治疗差异反应的潜在原因。通过组织微阵列的免疫组织化学染色对甲状腺癌及正常甲状腺组织中的CRABP-Ⅱ和FABP5表达水平进行分析，并通过多种实验方法阐明其与三种ATC细胞的维甲酸耐药性的关系。　　材料与方法：　　本研究所用的人未分化型甲状腺癌细胞系THJ-11T、THJ-16T和THJ-21T由大连医科大学肿瘤干细胞研究院刘强教授提供。286例人甲状腺癌组织标本由大连医科大学附属第一医院临床病理科和华南理工大学附属第二医院检验科友情提供，仅用于组织芯片的构建，不影响病理诊断。本研究采用细胞培养、MTT检测、HE染色、IHC检测、ICC检测、IF检测、RT-PCR技术、Western Blot技术和石蜡组织微阵列等实验方法，研究了下述内容：1）通过对不同ATC细胞的HE染色和MTT检测技术分析其RA敏感性差异;2）采用ICC、IF以及Western Blot观察三个细胞系中CRABP-Ⅱ和FABP5的表达情况，观察维甲酸经典信号通路组分CRABP-Ⅱ和FABP5在三种ATC细胞系中的表达情况;3)RA对CRABP-Ⅱ和FABP5转录水平的影响通过RT-PCR检测;4）去甲基化剂和FABP5抑制剂与RA联合用药后，通过HE染色、MTT检测法和镜下观察三个细胞系RA敏感性的变化，并通过ICC检测三个细胞系加药前后CRABP-Ⅱ和FABP5的变化情况;5）通过石蜡组织微阵列的IHC检测技术对人甲状腺癌组织中CRABP-Ⅱ和FABP5的表达情况进行观察。　　结果：　　1.HE染色显示，正常培养的三个ATC细胞系经RA处理后没有发现明显的形态学变化。MTT检测结果发现RA处理组的OD值高于N组和DMSO对照组。RA处理组与N组相比，有显著统计学差异(p＜0.05)，但此差异幅度较小。　　2.ICC和IF显示在三个细胞系中CRABP-Ⅱ表达水平均非常低，而FABP5水平明显很高。RT-PCR和Western Blot结果与上述ICC和IF结果相符合。　　3.三个ATC细胞系用GEM或GEM/RA联合处理后，MTT检测结果显示，GEM和GEM/RA联合处理组的细胞活性与正常培养细胞相比有明显降低，GEM和GEM/RA联合处理组之间的抑制率差异有统计学意义(p＜0.05)。　　4.在RA处理之前、与RA同时处理或独立使用FABP5的抑制剂作用于ATC细胞。MTT检测结果显示，其未能逆转ATC细胞的RA耐药性，ICC结果显示其对FABP5的表达没有抑制作用。　　5.将286例人甲状腺组织标本通过其各自的形态学特征分为N、A、DTC和ATC4种病理亚型。使用组织微阵列IHC染色分析四种甲状腺组织中的CRABP-Ⅱ和FABP5表达模式。　　结果：显示，不仅四种甲状腺组织中CRABP-Ⅱ和FABP5表达模式高度变化，而且每个病理亚型中的个体情况也有高度不同。　　结论：　　1.三种ATC细胞系没有表现出明显的RA敏感性，有促进细胞增殖的趋势。　　2.RA处理能够改变ATC细胞系的CRABP-Ⅱ和FABP5的表达模式，CRABP-Ⅱ低表达和FABP5高表达的状态可能是揭示ATC细胞RA耐药性的原因之一。　　3.去甲基化剂GEM及其与RA的联合用药处理可显著增加三种ATC细胞的RA敏感性，显著抑制细胞增殖，并能上调CRABP-Ⅱ的表达。　　4.FABP5抑制剂与RA联合用药处理并没有改变THJ-16T细胞对维甲酸抗性。　　5.CRABP-Ⅱ和FABP5在人甲状腺癌组织中的表达模式与其分化程度有关联，ATC中CRABP-Ⅱ下调明显，与ATC细胞RA抗性密切相关。CRABP-Ⅱ和FABP5的表达模式将用于预测ATC对RA治疗的反应，因此对ATC患者进行个体化的RA治疗具有重要的临床意义。