[目的]　　 在动脉粥样硬化(Atherosclerosis，As)发生发展过程中，泡沫细胞的形成是早期关键性事件。巨噬细胞来源的泡沫细胞形成是动脉粥样损伤形成的特征表现。促使胆固醇从巨噬细胞中外流对阻止泡沫细胞形成以及防止动脉粥样硬化的发生和发展具有重要意义。胆固醇以囊泡转运进行分泌已经得到公认，而在此过程中有高密度载脂蛋白-Ⅰ(apolipoprotein，apoA-Ⅰ)的介导，SCAMP2和YKT6是囊泡分泌蛋白，参与囊泡分泌转运，那么在apoA-Ⅰ介导的巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇流出过程中是否有这两种蛋白的参与，目前未见报道。本研究首先建立巨噬细胞源性泡沫细胞模型，采用高效液相色谱(HPLC)检测apoA-Ⅰ介导泡沫细胞内胆固醇流出的变化，在此基础上分析在apoA-Ⅰ介导的细胞内胆固醇流出过程中，SCAMP2和YKT6表达的变化，鉴定在此途径中是否有SCAMP2和YKT6参与。　　 [方法]　　 1.人单核THP-1细胞用含10％胎牛血清的RPMI-1640培养液培养，佛波酯(PMA)诱导人单核THP-1细胞，使其分化为巨噬细胞，然后加入乙酰化低密度脂蛋白(ac-LDL)，使巨噬细胞进一步诱导为泡沫细胞，建立巨噬细胞源性泡沫细胞模型。　　 2.巨噬细胞源性泡沫细胞经多聚甲醛固定，油红O染色，加苏木精复染，于相差显微镜下观察，对巨噬细胞源性泡沫细胞模型进行签定。　　 3.细胞分为巨噬细胞组、泡沫细胞组和加apoA-Ⅰ处理的泡沫细胞组，分别收集各组细胞和培养基，并分别提取胆固醇，以胆固醇标准品为对照，高效液相色谱法(HPLC)检测各组的胆固醇含量，计算胆固醇流出率。　　 4.细胞培养诱导成泡沫细胞后，根据SCAMP2和YKT6基因在GenBank中的序列设计、合成引物，通过RT-PCR半定量和Real-time PCR定量方法，分别分析巨噬细胞、泡沫细胞和apoA-Ⅰ处理的泡沫细胞中SCAMP2和YKT6基因表达。　　 5.Western blotting方法分析巨噬细胞、泡沫细胞和加apoA-Ⅰ处理的泡沫细胞中SCAMP2和YKT6蛋白表达。　　 [结果]　　 1.经油红O染色鉴定，成功建立了巨噬细胞源性泡沫细胞模型。　　 2.高效液相色谱法(HPLC)检测显示，加入apoA-Ⅰ介导了泡沫细胞内胆固醇的流出，其流出率变化为5.9％。　　 3.RT-PCR、Real-time PCR分析表明，与对照泡沫细胞相比，加入apoA-Ⅰ后泡沫细胞内SCAMP2基因表达量分别增加1.18倍和1.7倍；YKT6基因表达量分别增加1.2倍和1.9倍。　　 4.Western blotting分析证实了在apoA-Ⅰ介导泡沫细胞胆固醇流出过程中，与acLDL组相比，SCAMP2和YKT6蛋白表达量分别增加1.2倍和1.6倍。　　 [结论]　　 在apoA-Ⅰ介导的泡沫细胞内胆固醇流出过程中，囊泡转运蛋白SCAMP2和YKT6基因和蛋白表达都有升高，首次证实了囊泡转运蛋白SCAMP2和YKT6可能参与了apoA-Ⅰ介导的泡沫细胞内胆固醇转运过程。