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目的:探索使用氯化锰标记前列腺癌细胞株(PC-3)行体外磁共振成像(MRI)的可行性和安全性。
方法:将购买的PC-3进行复苏、培养和扩增。在37℃、5%CO2培养箱中,PC-3与8组含不同氯化锰浓度(0.1mM、0.3mM、0.5mM、1.0mM、2.0mM、3.0mM和5.0mM)的F-12 HAM'S培养基共同培养,1小时后收集,于3.0T磁共振成像仪行磁共振成像。另外,对不同细胞数量级(1.0×105个、5.0×105个、1.0×106个和2.0×106个)的标记PC-3和不同时间段(4小时、24小时和3天)的标记PC-3行磁共振成像。钙离子通道阻滞剂(维拉帕米)干预不同时间段(24小时和3天)的标记PC-3,磁共振成像观察其信号强度变化。不同氯化锰浓度标记的PC-3及标记后不同时间段的PC-3分别与CCK-8活细胞计数试剂盒反应后,酶联免疫检测仪测定其吸光度值(OD)。电子显微镜观察标记PC-3的变化。
结果:氯化锰标记的PC-3以缩短纵向弛豫时间T1为主,在T1WI-MRI上显示为高信号,不同氯化锰浓度标记的PC-3的信号强度与未标记的PC-3的信号强度具有统计学显著性差异(P<0.01)。1.0mM氯化锰标记的PC-3在细胞数量为5.0×105个时即可显示出高信号强度。在体外培养的条件下,标记后24小时的PC-3的信号强度明显下降,标记后3天基本恢复至未标记的PC-3的信号强度。钙离子通道阻滞剂(维拉帕米)可影响锰离子在细胞内外的分布并可适当延长氯化锰标记的PC-3的成像时间。标记后4小时,除0.1mM氯化锰对PC-3活性没有影响(P>0.05)外,其余各浓度组(>0.1mM)的氯化锰对PC-3均有不同程度的毒性影响(P<0.05);标记后24小时至14天,能形成峰值高信号强度的标记浓度(0.5~1.0mM)的氯化锰对细胞的活性影响不明显(P>0.05)。电子显微镜可以观察到锰离子沉积于个别线粒体内,致线粒体肿胀以及部分外膜和嵴消失。
结论:氯化锰可以有效标记PC-3,并能在T1WI-MRI上以高信号成像,在浓度低于或等于1.0mM时标记PC-3有一定的安全性,但细胞的标记维持时间较短。钙离子通道阻滞剂(维拉帕米)可适当延长PC-3的氯化锰标记维持时间。