【摘 要】
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研究目的胃癌是全球范围内因癌症死亡的第三位原因,寻找同胃癌发生及治疗相关的分子尤为重要。胎盘特异性基因1(placenta-specific 1,PLAC1),为癌-睾丸抗原家族成员,在肿瘤细胞中高表达,正常细胞中低表达,是肿瘤治疗的潜在靶点。因此本课题的研究目的是明确PLAC1在胃癌中的作用及机制并进一步探讨其作为胃癌治疗靶点的潜能。研究方法我们首先通过数据挖掘检索了PLAC1在胃癌患者中的表达
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研究目的胃癌是全球范围内因癌症死亡的第三位原因,寻找同胃癌发生及治疗相关的分子尤为重要。胎盘特异性基因1(placenta-specific 1,PLAC1),为癌-睾丸抗原家族成员,在肿瘤细胞中高表达,正常细胞中低表达,是肿瘤治疗的潜在靶点。因此本课题的研究目的是明确PLAC1在胃癌中的作用及机制并进一步探讨其作为胃癌治疗靶点的潜能。研究方法我们首先通过数据挖掘检索了PLAC1在胃癌患者中的表达及其临床相关性,并通过western blot检测了胃癌细胞SGC-7901、MGC-803,胃粘膜上皮细胞GES-1及胃癌组织、配对正常组织中PLAC1的表达含量。然后通过siRNA干扰PLAC1表达后,用克隆形成实验、CCK8细胞增殖实验及流式细胞周期检测的方法明确了干扰PLAC1表达后细胞增殖能力的变化,并通过western blot对PI3K/AKT信号通路相关蛋白的检查进一步探讨了其机制。为了进一步研究PLAC1是否可以作为胃癌治疗的靶点,我们用PLAC1抗体靶向治疗的方案以上述的方法再次检测了细胞增殖能力及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的变化。研究结果数据挖掘发现PLAC1在胃癌中高表达,并且高表达PLAC1的患者临床预后不佳,对胃癌细胞及组织中PLAC1表达的检测均证实了PLAC1在胃癌中高表达。siRNA干扰PLAC1表达后,细胞克隆形成减少、CCK8检测结果表明实验组吸光度值(A)为1.114±0.266,阴性对照组A值为1.668±0.609,差异有统计学意义(F=968.9,p<0.001),而且细胞周期阻滞在G0/G1期。对PI3K/AKT信号通路相关蛋白的检测表明p-AKT及cyclinD1的表达减少。不同浓度(0、1、2、4μg/ml)PLAC1抗体靶向作用后,细胞克隆形成减少并呈浓度依赖性、CCK8结果表明阴性对照组A为1.104±0.004,1ug/ml PLAC1抗体组A为0.9578±0.006,2ug/ml PLAC1抗体组A值为0.876±0.001,4ug/ml PLAC1抗体组A值为0.626±0.028,细胞增殖能力减弱呈现浓度依赖性,差异有统计学意义(F=576.6,P<0.001)、流式细胞周期检测同样表明PLAC1抗体作用后,细胞周期阻滞在G0/G1期。随后western blot检测表明PLAC1抗体作用后,p-AKT及cyclinD1的表达量降低。研究结论PLAC1在胃癌中高表达,可以通过PI3K/AKT信号通路促进胃癌细胞增殖,是胃癌治疗的潜在靶点。
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