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瞬时表达是在多种植物中得到广泛应用的一种快速验证基因功能的有效方法。与稳定转化的基因表达方法相比,瞬时表达技术不需要将靶基因整合到植物基因组中,可在短时间内研究基因的表达或功能。在瞬时表达技术体系中,常采用基因枪转化、农杆菌介导、原生质体转化和病毒载体介导等方法导入基因。基因枪介导的瞬时表达系统由于具有靶受体类型广、无宿主范围限制等优点,因此应用更加广泛。小麦中以叶片为受体的基因枪瞬时表达体系仍然存在表达效率低、稳定性差和轰击不均匀等问题。本研究利用GFP和GUS作为报告基因,通过改变叶片处理方式、质粒用量、质粒包裹方法和轰击距离等四个参数,优化了小麦叶片瞬时表达体系,将瞬时表达效率提高了一倍以上。将该体系应用于小麦叶片细胞与白粉菌的互作研究,使互作细胞数目提高了 35.8%～44.6%。应用该体系在感病小麦品种叶片中沉默隐性抗白粉病基因Mlo,进一步验证了优化体系的有效性。本实验室在抗白粉病栽培一粒小麦品系中分离了一个BAC,携带三个抗病基因类似物,分别为RGA2185、RGA3和RGA11。表达分析表明,三个抗病基因类似物受白粉菌诱导后上调表达。本研究利用病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)对这三个抗病基因类似物进行初步的功能分析。结果表明,病毒接种7天后三个基因均有不同程度的沉默,而只有接种RGA3病毒载体的植株表现出明显的白粉病症状,表明RGA3具有抗白粉病功能。