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目的: 多巴胺参与视网膜明暗适应、生理节律和营养过程等多种生理生化反应,但多巴胺受体在视网膜上具体分布的细胞类型目前尚不明确。本研究拟通过转基因小鼠和免疫荧光方法,检测多巴胺D1和D2受体在小鼠视网膜不同细胞亚型上的分布,为进一步明确多巴胺在视网膜上的功能及其机制研究奠定基础。 方法: 将3周龄携带红色荧光蛋白的Drd1a-tdTomato小鼠和携带绿色荧光蛋白的D2-EGFP小鼠进行冰冻切片和铺片取材,使用多种视网膜神经元特异性免疫荧光标记物进行染色,检测多巴胺D1和D2受体在小鼠视网膜不同细胞亚型上的分布情况及其表达比例。 结果: 免疫荧光结果显示,多巴胺D1受体中约39%表达于无长突细胞(NPAX6+D1R+/ ND1R),46%表达于双极细胞(NCHX10+D1R+/ ND1R),4%表达于水平细胞上(NPV(HC)+D1R+/ ND1R),剩余少量表达于神经节细胞层。在内核层中,D1受体主要表达于约37%±6%无长突细胞(NPAX6+D1R+/ NPAX6),其中约61%±8%GABA能无长突细胞(NGAD67+D1R+/ NGAD67)和几乎全部的PV阳性无长突细胞(NPV(AC)+D1R+/ NPV(AC))表达多巴胺D1受体。此外,约46%±4%视网膜双极细胞(NCHX10+D1R+/ NCHX10)表达多巴胺D1受体,其中约33%±4%ON视锥双极细胞(NGoα+D1R+/NGoα)和几乎全部的一类OFF视锥双极细胞(Nrecoverin+D1R+/ Nrecoverin)表达多巴胺D1受体。水平细胞几乎全部表达多巴胺D1受体(NPV(HC)+D1R+/ NPV(HC))。与D1受体分布不同的是,小鼠视网膜多巴胺 D2受体只表达在视网膜内核层无长突细胞上(NPAX6+D2R+/ ND2R),约占4%无长突细胞(NPAX6+D2R+/ NPAX6),其中7%表达于多巴胺能无长突细胞上(NTH+D2R+/ ND2R),而多巴胺能无长突细胞全部表达D2受体(NTH+D2R+/ NTH)。D2受体只有极少数表达于PV阳性无长突细胞,不表达于GABA能、乙酰胆碱能以及Calretinin阳性无长突细胞上。 结论: 小鼠视网膜内核层中,多巴胺D1受体主要在GABA能无长突细胞、PV阳性无长突细胞、水平细胞、ON视锥双极细胞以及一类OFF视锥双极细胞内表达。而D2受体主要表达于多巴胺能无长突细胞,极少数表达于PV阳性无长突细胞。