论文部分内容阅读
脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)在临床具有较高的发病率,其引发的一系列临床症状严重影响患者的生活质量,目前尚未找到确切有效的治疗方法。研究结果表明,神经干细胞(neural stem cells,NSCs)具有自我更新、多潜能分化、高度增殖和迁移等多项特性,应用NSCs治疗脊髓损伤时,可在损伤处定向分化成为功能细胞,在修复受损的脊髓神经组织中发挥着重要的作用。本试验主要研究单纯的神经干细胞,经过局部注射移植及蛛网膜下腔注射移植对比格犬5级深层痛觉缺失SCI模型修复的影响,并为神经干细胞治疗SCI临床应用研究工作奠定坚实的基础。本试验选取16只18月龄健康比格犬,随机分为4个组。分别为模型组、新鲜创NSCs局部注射治疗组、陈旧创NSCs蛛网膜下腔注射治疗组和新鲜创NSCs蛛网膜下腔注射治疗组,在犬背部左侧L2段脊髓采用球囊压迫方法,建立5级深层痛觉缺失SCI模型。在制作模型前1 d,造模后的1 d、3 d、7 d、14 d、21 d,28 d,44 d,56 d对每组实验犬进行行为学评分和采血,并测定其血液生理指标、生化指标ALB、CREA、ALP、TP、Ca、UA、LDH、AST、ALT、CRP、抗炎因子IL-10、PGE2、TNF-α、抗氧化因子SOD、MDA、T-AOC、神经表达因子Nestin、SHH。试验前1 d和造模后的1 d、3 d、7 d、14 d、28 d、44 d,将每组比格犬随机进行核磁共振成像检查,用于损伤脊髓结构观察。试验结果:1.比格成犬5级深层痛觉缺失SCI模型的实验的研究,发现压迫量控制在5ml和压迫时间控制在10 min时,对10±1 kg的比格犬进行持久性瘫痪脊髓损伤模型的建立,可达到临床上常见的持久性瘫痪脊髓损伤效果。2.通过局部注射移植和脊硬膜外注射移植这两种途径移植神经干细胞到脊髓损伤机体中,均可减少单核细胞数,降低脊髓损伤部位发生继发性炎症反应。3.神经干细胞移植治疗脊髓损伤机体中可减少溶骨现象,参与血钙调节,并对肾功能起到一定的保护作用。4.无论是陈旧创NSCs蛛网膜下腔注射治疗组,还是新鲜创NSCs蛛网膜下腔注射治疗组与局部注射组对比,在脊髓损伤后蛛网膜下腔注射能更好的提高比格犬的总抗炎能力,保护脊髓损伤组织,防止其过度氧化反应,预防脊髓继发性损伤。5.神经干细胞在急性、慢性脊髓损伤前期通过蛛网膜下腔注射移植途径可大大提高SHH含量,有助于脊髓损伤的修复。脊髓损伤修复后期,在没有提高任何治疗的前提下,机体自体可产生内源性SHH,有助于自体损伤修复。6.NSCs通过蛛网膜下腔注射治疗脊髓损伤,可较快提高脊髓损伤犬机体前列腺素E2浓度。7.说明通过蛛网膜下腔注射NSCs治疗,可在脊髓损伤后更长时间的提高血液中乳酸脱氢酶的活性。局部注射NSCs可在较早时间调控乳酸脱氢酶的活性,但维持时间短,蛛网膜下腔注射NSCs对乳酸脱氢酶活性的调控没有局部注射移植早,但维持时间较长,有利于脊髓损伤的修复。